应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 提DNA纯度要么徘徊在1.5要么大于2，甚至到5点几，求助！
51/1返回列表
查看: 2803  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

dr西小瓜

新虫 (初入文坛)

[求助] 提DNA纯度要么徘徊在1.5要么大于2，甚至到5点几，求助！ 已有4人参与

各位大神，小白现在提大肠杆菌DNA准备跑PCR的，用TAKARA DNAiso reagent，用无水乙醇后都看不到沉淀的，提了3次，10管只有一管是A260/280浮动在1.8的。我想问下——    1，百度到的对提DNA的纯度要求不一样 ，到底1.6-1.8还是1.8-2.0较好？我跑pcr的是不是不用对纯度要求那么严格？那也得有个度吧？大概多少？
             2，有谁做过类似的吗？没沉淀是因为我提的不好吗？
             3，我测纯度的时候，同一样品相差很大，舍友说因为我没混匀。我是那样想的，前面1ml枪头都要剪去2-3mm以减小剪切力对DNA的伤害，我就不敢用小枪头混匀了……怎么办啊？
             4，我要不要来个煮沸法对照一下下？煮沸法我看到大家的做法也不太一样，有谁用煮沸法提过大肠杆菌的DNA吗？我要提的大概是1KB 。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2015-05-04 08:44:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangranjun

荣誉版主 (知名作家)

广庭之惘然

优秀版主

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-05-05 22:45:45
A260/280在1.8-2.0之间是纯度较好，高于或低于这个数字可能有酚或RNA等污染。混匀很重要，可以采用轻柔的方式混匀。祝顺利
赞一下 回复此楼
他日扬翼九万里，历大千世界，定我红尘心！
3楼2015-05-04 16:58:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

WHABnew

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-05-05 22:45:26
建议你看下测浓度的仪器，以前我们做反转测RNA浓度，测四五次浓度都不一样差别还很大，以至于最后就直接测一次算了。
赞一下 回复此楼
2楼2015-05-04 14:32:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

aofeng860308

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-05-05 22:46:05
比值是1.8-2.0比较好。如果实验目的是做PCR的话，建议不用抽提基因组，直接用菌液做模板即可。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
4楼2015-05-04 18:14:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dr西小瓜

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by WHABnew at 2015-05-04 14:32:00
建议你看下测浓度的仪器，以前我们做反转测RNA浓度，测四五次浓度都不一样差别还很大，以至于最后就直接测一次算了。

仪器是NANO2000
回复此楼
5楼2015-05-04 18:58:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭