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提DNA纯度要么徘徊在1.5要么大于2，甚至到5点几，求助！ 已有4人参与
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各位大神，小白现在提大肠杆菌DNA准备跑PCR的，用TAKARA DNAiso reagent，用无水乙醇后都看不到沉淀的，提了3次，10管只有一管是A260/280浮动在1.8的。我想问下—— 1，百度到的对提DNA的纯度要求不一样 ，到底1.6-1.8还是1.8-2.0较好？我跑pcr的是不是不用对纯度要求那么严格？那也得有个度吧？大概多少？ 2，有谁做过类似的吗？没沉淀是因为我提的不好吗？ 3，我测纯度的时候，同一样品相差很大，舍友说因为我没混匀。我是那样想的，前面1ml枪头都要剪去2-3mm以减小剪切力对DNA的伤害，我就不敢用小枪头混匀了……怎么办啊？ 4，我要不要来个煮沸法对照一下下？煮沸法我看到大家的做法也不太一样，有谁用煮沸法提过大肠杆菌的DNA吗？我要提的大概是1KB 。 |
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