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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 从人基因组中钓取一段基因的问题
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halfbeer

捐助贵宾 (小有名气)

这是啥？

[求助] 从人基因组中钓取一段基因的问题 已有2人参与

我想问下从人血中提取全基因组，然后pcr用引物钓取，这个方法行的通吗，过程难吗？

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现在我们能做的就是努力努力再努力
1楼 2015-04-30 13:38:11
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halfbeer

捐助贵宾 (小有名气)

这是啥？
自己顶下

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现在我们能做的就是努力努力再努力
2楼2015-04-30 21:43:28
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小小逍遥人

金虫 (正式写手)

张斌猪
你做下 不难
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生命还需要奇迹来衬托
3楼2015-04-30 23:58:31
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shenma521

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
halfbeer: 金币+3, ★★★很有帮助 2015-05-01 06:36:36
不难，挺简单的，前提是你得好好设计一或二对特异性较好的引物。
选用高保真高效率酶。
从血液里提取的基因组，要确保提出的基因组质量良好，pcr调取基因组上的基因很简单，我分子构建经常需要这么做。

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4楼2015-05-01 00:33:13
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halfbeer

捐助贵宾 (小有名气)

这是啥？
引用回帖:
4楼: Originally posted by shenma521 at 2015-05-01 00:33:13
不难，挺简单的，前提是你得好好设计一或二对特异性较好的引物。
选用高保真高效率酶。
从血液里提取的基因组，要确保提出的基因组质量良好，pcr调取基因组上的基因很简单，我分子构建经常需要这么做。
...

谢谢你

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5楼2015-05-01 06:37:04
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yingheqian

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
halfbeer: 金币+1, ★★★很有帮助 2015-05-01 23:11:29
这是基因组意义上的基因，很基本和简单的工作。做这个的目的是什么？如果要克隆编码区应是rtpcr

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6楼2015-05-01 06:43:39
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halfbeer

捐助贵宾 (小有名气)

这是啥？
引用回帖:
6楼: Originally posted by yingheqian at 2015-05-01 06:43:39
这是基因组意义上的基因，很基本和简单的工作。做这个的目的是什么？如果要克隆编码区应是rtpcr

实验室需要一段人的基因序列，我打算用pcr钓取出来然后克隆表达

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7楼2015-05-01 09:20:14
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yingheqian

金虫 (著名写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by halfbeer at 2015-05-01 09:20:14
实验室需要一段人的基因序列，我打算用pcr钓取出来然后克隆表达
...

那你应该是先抽提RNA，做逆转录，根据基因编码区设计引物扩增编码区。多看看分子生物学的书。
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8楼2015-05-01 09:34:49
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halfbeer

捐助贵宾 (小有名气)

这是啥？
引用回帖:
8楼: Originally posted by yingheqian at 2015-05-01 09:34:49
那你应该是先抽提RNA，做逆转录，根据基因编码区设计引物扩增编码区。多看看分子生物学的书。...

我在NCBI上找了一下，这段基因很长大约15000bp，而且真核细胞的基因有内含子，这段基因的编码区分成了9段，我是要把这9段都p出来吗
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9楼2015-05-06 15:31:23
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halfbeer

捐助贵宾 (小有名气)

这是啥？
引用回帖:
4楼: Originally posted by shenma521 at 2015-05-01 00:33:13
不难，挺简单的，前提是你得好好设计一或二对特异性较好的引物。
选用高保真高效率酶。
从血液里提取的基因组，要确保提出的基因组质量良好，pcr调取基因组上的基因很简单，我分子构建经常需要这么做。
...

我在NCBI上找了一下，这段基因很长大约15000bp，而且真核细胞的基因有内含子，这段基因的编码区分成了9段，我是要把这9段都p出来吗？
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10楼2015-05-06 16:43:27
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