24小时热门版块排行榜    

查看: 2030  |  回复: 3

DZQ196536

新虫 (初入文坛)

[交流] 真菌ITS保守序列PCR无条带 已有3人参与

如题,我最近做真菌菌种鉴定,利用ITS1和ITS4作引物来扩增保守序列,然后测序,在genebank进行比对。但在做PCR的过程中,总有些菌无条带,不知道是哪里的问题。我提取基因组DNA用的快提法,即核酸提取仪破碎,除蛋白直接用上清液做模板。PCR应该没问题,所做真菌包括青霉菌,曲霉等。求各位大神解答。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

欢迎交流Q1084114302
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

林夕0825

金虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我也在做真菌鉴定,可是用ITS1和ITS4扩增出来的条带然后比对,可是所有的相似度都是99%甚至有些都是100%的,到底该确定那个才是我的这个菌呢?
2楼2015-05-12 10:06:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

IPCAAS

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
2楼: Originally posted by 林夕0825 at 2015-05-12 10:06:42
我也在做真菌鉴定,可是用ITS1和ITS4扩增出来的条带然后比对,可是所有的相似度都是99%甚至有些都是100%的,到底该确定那个才是我的这个菌呢?

首先从形态学上菌落颜色,气生菌丝的特征以及子实体和分生孢子的形态上观察,判别病菌的种类,再结合ITS序列比对,找相似性99-100%以上的而且种类最多的种,最好再扩增真菌的其他基因片段进行验证,比如BT,EF1α基因等等。
3楼2015-06-09 15:53:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

木子君君

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我也是,做的混菌,用的引物是ITS4,扩增不出条带,好难受,你现在解决了吗问题
4楼2021-10-21 11:08:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 DZQ196536 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 北科281学硕材料求调剂 +6 tcxiaoxx 2026-03-20 6/300 2026-03-22 20:23 by edmund7
[考研] 298求调剂 +6 上岸6666@ 2026-03-20 6/300 2026-03-22 20:21 by edmund7
[考研] 一志愿武理材料工程348求调剂 +5  ̄^ ̄゜汗 2026-03-19 7/350 2026-03-22 19:44 by 公瑾逍遥
[考研] 能源材料化学课题组招收硕士研究生8-10名 +5 脱颖而出 2026-03-16 17/850 2026-03-22 15:18 by 脱颖而出
[基金申请] 山东省面上项目限额评审 +4 石瑞0426 2026-03-19 4/200 2026-03-22 08:50 by Wei_ren
[考研] 333求调剂 +5 87639 2026-03-21 7/350 2026-03-21 19:31 by ColorlessPI
[考研] 0703化学297求调剂 +3 Daisy☆ 2026-03-20 3/150 2026-03-21 17:45 by ColorlessPI
[考研] 材料与化工(0856)304求 B区 调剂 +3 邱gl 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:47 by lature00
[考研] 南昌大学材料专硕311分求调剂 +6 77chaselx 2026-03-20 6/300 2026-03-21 07:24 by JourneyLucky
[考研] 一志愿山大07化学 332分 四六级已过 本科山东双非 求调剂! +3 不想理你 2026-03-16 3/150 2026-03-21 03:59 by JourneyLucky
[考研] 274求调剂 +10 S.H1 2026-03-18 10/500 2026-03-20 23:51 by JourneyLucky
[考研] 一志愿中海洋材料工程专硕330分求调剂 +8 小材化本科 2026-03-18 8/400 2026-03-20 23:16 by JourneyLucky
[考研] 一志愿武汉理工材料工程专硕调剂 +9 Doleres 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:36 by JourneyLucky
[考研] 中南大学化学学硕337求调剂 +3 niko- 2026-03-19 6/300 2026-03-20 21:58 by luoyongfeng
[考研] 材料学硕297已过四六级求调剂推荐 +11 adaie 2026-03-19 11/550 2026-03-20 21:30 by laoshidan
[考研] 295复试调剂 +8 简木ChuFront 2026-03-19 8/400 2026-03-20 20:44 by zhukairuo
[考研] 0817 化学工程 299分求调剂 有科研经历 有二区文章 +22 rare12345 2026-03-18 22/1100 2026-03-20 20:39 by zhukairuo
[考研] 一志愿福大288有机化学,求调剂 +3 小木虫200408204 2026-03-18 3/150 2026-03-19 13:31 by houyaoxu
[硕博家园] 湖北工业大学 生命科学与健康学院-课题组招收2026级食品/生物方向硕士 +3 1喜春8 2026-03-17 5/250 2026-03-17 17:18 by ber川cool子
[考研] 070300化学学硕求调剂 +6 太想进步了0608 2026-03-16 6/300 2026-03-16 16:13 by kykm678
信息提示
请填处理意见