24小时热门版块排行榜    

查看: 4497  |  回复: 12
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

小马fight

新虫 (初入文坛)

[求助] 请教各位关于动物组织RNA提取的的问题,一直提不出来,请各位给点建议。 已有9人参与

就从头开始说吧,研一的学生,年前开始做这个方面,但一直跑不出条带,用尿囊液可以提取出来,用的是罗氏病毒RNA提取试剂盒,用的剪刀、镊子、研钵、研磨器高压灭菌,送来的病料一般是冷冻的,解冻之后在冰上研磨,加的是PBS(上一次加了用DEPC处理的水,但也没出条带),研磨之后13000r离心15分钟,取200微升上清用试剂盒提取总RNA,大体步骤是这样,问一下各位常做这个的这些步骤里面哪些会有RNA酶污染,老师给提供了固相RNA酶清除剂,但还没有使用,请各位提供点经验吧,谢谢了。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cckk_2000

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

冰上研磨不靠谱,用液氮研磨,温度不够,研磨不彻底,会使研磨时间增加,RNA降解加快
科研炮灰
6楼2015-05-15 08:37:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答

小马fight

新虫 (初入文坛)

来大神解答一下吧
2楼2015-04-10 15:31:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liyibo373

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我觉得冰上研磨的时候,应该加trizol研磨吧。我不是太懂,仅供参考
互相交流,互相学习,共同进步
3楼2015-04-20 13:39:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

527219179

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

研钵灭菌后,用之前可以用酒精烧烧,样品不需解冻,解冻之后RNA迅速降解,冰上研磨要迅速,推荐液氮研磨,研磨之后迅速转管,转管之后直接加裂解液,按照试剂盒步骤提取即可。不知道你为什么要先加水研磨离心再取上清?研磨之后大部分RNA还在细胞中,只有少量释放,所以需要加裂解液裂解细胞释放RNA。个人看法,最后你提的到底病毒还是动植物?
4楼2015-05-04 12:31:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的? +12 爱看书的可乐 2026-08-26 14/700 2026-08-26 13:50 by coolysnow
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +26 yaoyewhu2008 2026-08-20 28/1400 2026-08-26 13:49 by zzuzxg
[基金申请] 系统查不到 +9 董八千 2026-08-26 9/450 2026-08-26 12:30 by yanmofang
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 国际合作可查了,中了面上 +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +22 koalala 2026-08-24 25/1250 2026-08-26 11:14 by dxcharlary
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +4 叶九微 2026-08-26 4/200 2026-08-26 10:52 by xiacongxu
[基金申请] 国合现在查不到了吗? +10 chengyan1220 2026-08-24 20/1000 2026-08-26 08:57 by peasantsprig
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候,我看到了怒放的梅花。 (金币+10) +6 ziyangfang 2026-08-25 9/450 2026-08-25 20:26 by huagongfeihu
[基金申请] 明天应该可查了!? +6 chengyan1220 2026-08-23 6/300 2026-08-25 19:45 by zfd97
[基金申请] 有没有大神帮我看看基金代码 28+4 1234567wang 2026-08-24 10/500 2026-08-25 19:15 by lfy8008
[基金申请] 今日不放榜?网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +17 医学老男孩 2026-08-20 22/1100 2026-08-25 15:36 by 医学老男孩
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑,不妨来听听这首《基金之外》 +8 scalable 2026-08-24 8/400 2026-08-25 12:52 by jnhyjjm
[教师之家] 导师吐槽:我怎么摊上了这么个极品研究生! +3 苏东坡二世 2026-08-23 3/150 2026-08-25 10:35 by shisan1313
[基金申请] 我面上完蛋了 +13 且听虎啸 2026-08-20 14/700 2026-08-25 09:10 by mrkang
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +13 kulium 2026-08-21 16/800 2026-08-24 16:27 by superceng
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办? +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
[基金申请] 时间戳今天,20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
[基金申请] 看来今天不会放榜了? +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
信息提示
请填处理意见