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huantao12

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[求助] 枯草基因敲除已有2人参与

各位大神，小弟最近刚涉及分子生物学，想咨询一下各位。在做枯草的基因敲除时，有没有比较好的体系，或者质粒什么的。由于实验室的敲出体系用的是Sac B 基因作为反向筛选的，不知道还有没别的比较好的手段作为反向筛选压力的。小弟非常期待你们的答复。。。

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1楼 2015-04-04 10:29:48

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huantao12

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引用回帖:

8楼: Originally posted by liygmail at 2015-04-06 00:23:13
负筛选标记基因有mazF和upp
用含有正、负筛选标记基因以及同源臂的自杀质粒和线性DNA可进行基因无痕敲除，原理略有不同：
以自杀质粒敲除采用的两次前后两次单交换；
利用线性DNA盒子敲除涉及一次双交换和一次单 ...

非常感谢，还想请问一下，这两个基因的启动子有特别的要求吗？