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[交流]
基因敲除、互补、功能研究等实验怎么做?
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本人研究生,做黄单胞,在通过Tn5构建转化子库之后,通过致病力筛选、Tail-PCR获得侧翼序列、比对获得全基因之后,将几个可能与致病力相关的基因做了敲除,现在正在构建互补载体,已经做了敲除转化子的胞外酶活性测定、胞外多糖分泌测定、生长曲线、致病性测定等等,不过不知道将互补做完了之后还有什么可以做的。根据其他研究生、博士生等的毕业论文发现,基本也就是做这些:互补之后观察致病力变化,然后讨论可能性。 有些厉害的还做了蛋白,不过比较少,没怎么看懂,实验室做蛋白比较少。那我假如想继续往下做,除了互补可以做哪些?而且老板经常说做的太少,但是感觉分子实验没有太大的量,像现在构建载体,然后验证,然后点击互补,然后再验证,然后做个Southern,感觉就差不多了。 看的文献不够广,懂的也不多,请各位前辈大牛指教,交流下怎么这个实验路线怎么设计,怎样可以做好做深。 |
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