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小篮子1988

铜虫 (小有名气)

[求助] 枯草芽孢杆菌在种子培养基中的生长问题 已有3人参与

种子罐容积5L,连续好几次发酵,接种后迟迟不生长,以前接种6小时后便开始升温生长,现在都要12个多小时,这次有个罐24小时都没生长一直降温,种子应该没问题在摇床小瓶培养生长很好,请高手指点哪个地方出现问题,若感染噬菌体的话会有什么现象?
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wzq_ing

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

楼主啊,你用的是什么培养基???
你既然检查了种子和培养菌液都没问题,估计是配方上的问题了,
有的配方在实验室摇瓶可以,上罐就不行了
我开始做的,也是在摇瓶里长的很好,到罐子里数量上不去,后来查了下资料,自己优化了下配方,罐子的配方完全改了,做的数量不错,长的很好,基本在50亿以上
13楼2012-10-11 15:51:34
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普通回帖

javadig

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
能否把接种时种子浓度、控温情况等条件说详细一点儿?觉得描述有点儿笼统.

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
2楼2012-10-04 20:05:51
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小篮子1988

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by javadig at 2012-10-04 20:05:51
能否把接种时种子浓度、控温情况等条件说详细一点儿?觉得描述有点儿笼统.

接种浓度没法定量,从茄瓶(大约150ml的营养琼脂)刮的菌体用600ml的蒸馏水悬浮,培养温度保持37度左右
3楼2012-10-05 20:49:01
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chshen06188

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

取5L种子罐培养基接种前样做对照培养,以检查培养基是否有问题。种子也做对照培养,以检查种子本身是否有问题。
竹杖芒鞋轻胜马,一蓑风雨任平生。
4楼2012-10-09 09:57:30
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小篮子1988

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by chshen06188 at 2012-10-09 09:57:30
取5L种子罐培养基接种前样做对照培养,以检查培养基是否有问题。种子也做对照培养,以检查种子本身是否有问题。

做过呢,接种前后都做过,摇床培养都不错,可大罐长的就是慢
5楼2012-10-09 11:08:47
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chshen06188

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


小篮子1988: 金币+1, 设备操作、种子跟以前没啥区别,然后这几次连续生产就是生长慢,我们是一次性加料,中间不补料,不知这位朋友知不知道怎样检测消泡剂? 2012-10-10 13:46:52
引用回帖:
5楼: Originally posted by 小篮子1988 at 2012-10-09 11:08:47
做过呢,接种前后都做过,摇床培养都不错,可大罐长的就是慢...

如果同样的培养基同样的种子大罐长得慢, 就是检查大罐设备系统是否有问题,大罐补料,通风系统是否有问题了。
竹杖芒鞋轻胜马,一蓑风雨任平生。
6楼2012-10-09 11:42:48
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liuyuetq

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

想问一下楼主的初始通风量是多少
用你的心情过好我的每一天!
7楼2012-10-10 09:04:36
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stirith

木虫之王 (文坛精英)

【答案】应助回帖


小篮子1988: 金币+1, 谢谢这位朋友的提议,呵呵 2012-10-10 13:47:22
怀疑感染噬菌体的话可以用平板检查,用确定生长正常的菌液涂平板,长出密集菌落以后,用怀疑有噬菌体的菌液在上面划线,如果过夜以后划线的地方原来长出的菌落消失,就说明染噬菌体了
8楼2012-10-10 09:32:03
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chshen06188

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by chshen06188 at 2012-10-09 11:42:48
如果同样的培养基同样的种子大罐长得慢, 就是检查大罐设备系统是否有问题,大罐补料,通风系统是否有问题了。...

消泡剂的影响可以通过小试或者摇瓶试验进行对照试验。
竹杖芒鞋轻胜马,一蓑风雨任平生。
9楼2012-10-11 08:15:54
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l68266152

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

通气量,搅拌速度,要注意
相信自己
10楼2012-10-11 10:18:31
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