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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 枯草芽孢杆菌涂布平板不生长怎么回事？
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summerplum

金虫 (小有名气)

[求助] 枯草芽孢杆菌涂布平板不生长怎么回事？

本人用枯草芽孢杆菌做毒性实验，保存在4度冰箱里的枯草芽孢杆菌接种至LB液体培养基，28度振荡培养12h，然后用生理盐水洗涤制备菌悬液，调至OD600=1.0，稀释100倍，然后再10倍稀释三到四个梯度，涂布平板(LB），28度过夜培养竟然看不到一个细菌。而大肠杆菌在相同稀释条件下则生长得很好。为什么呢，郁闷，已经第二次做了。求解答！！为什么在液体培养基里长得好好的，划线在平板上长得也不错，涂布到平板上就不行了？
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1楼 2011-09-09 09:31:16
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

anlewo7777

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

summerplum(金币+5): 谢谢，我提高到30了，菌浓比大肠杆菌多10倍都一个没有。 2011-09-09 13:01:53
稀释浓度大一点再试试看，另外，培养温度提到30°试试。我估计是你的菌浓小了，枯草芽孢杆菌长的稍慢了点
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2楼2011-09-09 11:22:34
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jsszzq

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
amisking(金币+2): 鼓励发帖交流。 2011-09-09 19:42:18
summerplum(金币+3): 谢谢，我下次试下 2011-09-10 13:49:01
菌液浓度太低，枯草芽孢杆菌菌液浓度应比大肠杆菌多100倍以上，培养温度应在30～35℃
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3楼2011-09-09 15:40:33
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xhg207

金虫 (正式写手)
★ ★ ★
amisking(金币+3): 鼓励应助。 2011-09-09 19:42:24
注意两点：1 可能稀释导致浓度太低。
          2 稀释的过程中，每一步都要用振荡器使菌均匀，然后再取菌稀释。
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» 本帖已获得的红花（最新10朵）

summerplum
4楼2011-09-09 16:57:11
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lhl0538

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
zhang8826857(金币+1): 鼓励一下^_^ 2011-10-18 08:30:20
summerplum(金币+2): 2011-10-25 10:48:07
枯草芽孢杆菌的多数生长温度在30-37度，还有你试试在LB培养基中添加0.5%的葡萄糖试试。
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6楼2011-10-18 08:15:48
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wind_king85

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
15楼: Originally posted by wangyuelou at 2014-11-05 09:01:20
初学生物的弱弱问一句，加玻璃珠是为什么？...

刚好看到回答一下：为了将菌液中的菌体打碎，更均匀。
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16楼2014-11-05 11:43:59
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普通回帖

summerplum

金虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by xhg207 at 2011-09-09 16:57:11:
注意两点：1 可能稀释导致浓度太低。
          2 稀释的过程中，每一步都要用振荡器使菌均匀，然后再取菌稀释。

谢谢回答，只是你可能没有点应助回帖，我不能送你金币了，只能送你鲜花，呵呵
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5楼2011-09-10 13:52:38
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笨猫407

金虫 (小有名气)
浓度是太低了，一般稀释至10-5、10-6就可以了
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7楼2011-11-09 15:35:06
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498116841

银虫 (小有名气)
当然是扩大稀释倍数，遇到这样的情况都大同小异
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呵呵。。。科研
8楼2012-03-18 14:21:43
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孔名卓

禁虫 (正式写手)
本帖内容被屏蔽
9楼2012-03-28 20:08:20
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yupeibin

禁虫 (正式写手)
本帖内容被屏蔽
10楼2012-03-28 21:06:46
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