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胆小鬼MXY

新虫 (初入文坛)

[求助] 枯草芽孢杆菌 菌悬液打散 梯度稀释

各位高手 你好 第一次登陆小木虫,请多指教!!我有问题想求助,怎样将枯草芽孢杆菌的菌悬液打散呢?就是 从斜面刮下一环到生理盐水中,但是镜检发现总是一团一团的,我想让它在菌悬液是分散的状态,现在我已经尝试用过:吐温,玻璃珠,效果都不明显~~~求帮助啊~~~
还有,从高浓度到低浓度稀释要不要换枪头呢?有没有什么要注意的地方?我从高浓度到低浓度做梯度 然后倾注法涂布,总是做不出十倍的梯度(有时10-8 浓度上的平板菌落比10-7浓度上的平板菌落还要多),不解啊~~~求高人指点!!!谢谢~~~
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zjwsw

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
amisking: 金币+4, MicEPI+1, 鼓励发帖帮助解答问题。 2012-07-06 20:37:29
胆小鬼MXY: 金币+1, ★★★很有帮助 2012-07-07 09:57:50
把枯草芽孢杆菌从斜面刮下一环到含吐温含玻璃珠的生理盐水中(沿瓶壁轻轻洗下),震荡10分钟;
还有,从高浓度到低浓度稀释最好要换无菌枪头,并每次把稀释管用微型振荡器诊断10S, 然后吸取0.1ml涂布,同一稀释度做3个平行。一般多练习就行了。
2楼2012-07-06 15:13:27
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胆小鬼MXY

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zjwsw at 2012-07-06 15:13:27
把枯草芽孢杆菌从斜面刮下一环到含吐温含玻璃珠的生理盐水中(沿瓶壁轻轻洗下),震荡10分钟;
还有,从高浓度到低浓度稀释最好要换无菌枪头,并每次把稀释管用微型振荡器诊断10S, 然后吸取0.1ml涂布,同一稀释度 ...

好的~~我再试试~~谢谢帮忙~~~
3楼2012-07-07 09:57:19
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胆小鬼MXY

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zjwsw at 2012-07-06 15:13:27
把枯草芽孢杆菌从斜面刮下一环到含吐温含玻璃珠的生理盐水中(沿瓶壁轻轻洗下),震荡10分钟;
还有,从高浓度到低浓度稀释最好要换无菌枪头,并每次把稀释管用微型振荡器诊断10S, 然后吸取0.1ml涂布,同一稀释度 ...

我们实验室只有漩涡振荡仪~~可不可以?菌悬液是否打散对做梯度有影响吗?我试过把一环从斜面上刮下的枯草直接放在种子液中,培养12小时,然后镜检,发现从种子液中取得的液体去镜检,菌体是分散的。这样应该就不会影响梯度稀释和涂平板吧?
4楼2012-07-07 11:13:12
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zjwsw

铜虫 (小有名气)

漩涡振荡仪可以的,菌悬液打散均匀才能准确计数。
5楼2012-07-07 19:47:42
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