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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 枯草芽孢杆菌 菌悬液打散 梯度稀释
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胆小鬼MXY

新虫 (初入文坛)

[求助] 枯草芽孢杆菌 菌悬液打散 梯度稀释

各位高手 你好 第一次登陆小木虫，请多指教！！我有问题想求助，怎样将枯草芽孢杆菌的菌悬液打散呢？就是 从斜面刮下一环到生理盐水中，但是镜检发现总是一团一团的，我想让它在菌悬液是分散的状态，现在我已经尝试用过：吐温，玻璃珠，效果都不明显~~~求帮助啊~~~
还有，从高浓度到低浓度稀释要不要换枪头呢？有没有什么要注意的地方？我从高浓度到低浓度做梯度 然后倾注法涂布，总是做不出十倍的梯度（有时10-8 浓度上的平板菌落比10-7浓度上的平板菌落还要多），不解啊~~~求高人指点！！！谢谢~~~
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1楼2012-07-06 15:00:15
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zjwsw

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
amisking: 金币+4, MicEPI+1, 鼓励发帖帮助解答问题。 2012-07-06 20:37:29
胆小鬼MXY: 金币+1, ★★★很有帮助 2012-07-07 09:57:50
把枯草芽孢杆菌从斜面刮下一环到含吐温含玻璃珠的生理盐水中（沿瓶壁轻轻洗下），震荡10分钟；
还有，从高浓度到低浓度稀释最好要换无菌枪头，并每次把稀释管用微型振荡器诊断10S， 然后吸取0.1ml涂布，同一稀释度做3个平行。一般多练习就行了。
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2楼2012-07-06 15:13:27
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胆小鬼MXY

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zjwsw at 2012-07-06 15:13:27
把枯草芽孢杆菌从斜面刮下一环到含吐温含玻璃珠的生理盐水中（沿瓶壁轻轻洗下），震荡10分钟；
还有，从高浓度到低浓度稀释最好要换无菌枪头，并每次把稀释管用微型振荡器诊断10S， 然后吸取0.1ml涂布，同一稀释度 ...

好的~~我再试试~~谢谢帮忙~~~
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3楼2012-07-07 09:57:19
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胆小鬼MXY

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zjwsw at 2012-07-06 15:13:27
把枯草芽孢杆菌从斜面刮下一环到含吐温含玻璃珠的生理盐水中（沿瓶壁轻轻洗下），震荡10分钟；
还有，从高浓度到低浓度稀释最好要换无菌枪头，并每次把稀释管用微型振荡器诊断10S， 然后吸取0.1ml涂布，同一稀释度 ...

我们实验室只有漩涡振荡仪~~可不可以？菌悬液是否打散对做梯度有影响吗？我试过把一环从斜面上刮下的枯草直接放在种子液中，培养12小时，然后镜检，发现从种子液中取得的液体去镜检，菌体是分散的。这样应该就不会影响梯度稀释和涂平板吧？
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4楼2012-07-07 11:13:12
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zjwsw

铜虫 (小有名气)
漩涡振荡仪可以的，菌悬液打散均匀才能准确计数。
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5楼2012-07-07 19:47:42
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