| 查看: 5058 | 回复: 9 | ||||
| 本帖产生 1 个 MicEPI ，点击这里进行查看 | ||||
[交流]
【求助/交流】枯草芽孢杆菌基因敲除~~
|
||||
|
想请教一下做枯草芽孢杆菌的朋友，枯草芽孢杆菌敲除目前有没有无抗敲除的方法呢？那个WB700的菌是利用什么方法获得的，为什么能够敲除那么多的基因？都是用的有抗敲除吗？ 如果总是用抗性的话那是不是只能敲除有限的基因啦？~~ 谢谢帮我解答啦~~~ |
回复此楼» 猜你喜欢
中！中！中！
已经有5人回复
-
职称论文投稿
已经有9人回复
-
国自然申请五篇代表作大比拼，感觉这个是最重要的
已经有9人回复
-
无聊看看时间戳打发时间
已经有3人回复
-
基于自然哲学类比的风化壳型稀土矿
已经有14人回复
-
评委有多少概率知道其他专家手中有哪些人的本子？
已经有6人回复
-
求推荐期刊，重谢
已经有3人回复
-
E0414, 我的本子有没有希望？
已经有17人回复
-
青A35岁以下通知答辩了吗
已经有4人回复
-
小城的小雨
已经有3人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 求助新问题，从“枯草芽孢杆菌摇瓶接种子罐时菌龄和芽孢率 ”说开去
已经有19人回复
- 地衣芽孢杆菌的基因敲除到底如何做啊？
已经有6人回复
- 枯草芽孢杆菌涂布平板不生长怎么回事？
已经有16人回复
- 【求助/交流】求工业生产杀死枯草芽孢杆菌的方法
已经有10人回复
- 【求助/交流】有关于枯草芽孢杆菌形态
已经有19人回复
- 【求助/交流】芽孢杆菌属的基因敲除方法
已经有12人回复
- 【求助/交流】枯草芽孢杆菌转外源基因
已经有18人回复
- 【求助/交流】如何使枯草芽孢杆菌产芽孢
已经有10人回复
- 【求助/交流】枯草芽孢杆菌的保存
已经有16人回复
- 【求助/交流】紧急求助枯草芽孢杆菌的选择培养基配方
已经有9人回复
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
-
荷兰格罗宁根大学F. Maresca教授新开放一个全奖PhD位置（沉淀强化+多尺度建模）
+1/98
-
温州医科大学李校堃院士团队宋林涛/黄志锋课题组诚聘博士后
+1/75
-
上海985专排第一的软工学院课题组接收AI生物计算方向的推免保研硕士
+1/32
-
西南交通大学环境科学与工程学院龙明策团队诚聘博士后
+1/30
-
四川大学周加境课题组招聘博士后/博士/研究助理（生物质与藻类资源利用/自组装材料）
+1/30
-
中山大学智能工程学院【空间智能方向】招收2027年入学博士生
+2/24
-
中山大学智能工程学院【智能视觉方向】金枝教授团队招聘博士后
+2/16
-
澳大利亚西澳大学招收交通工程/智能交通方向博士生
+1/13
-
北理工集成电路杰青团队 | 诚招科助理
+1/7
-
墨尔本大学(26年QS19)招全奖博士/CSC博士(补齐全奖)/访问学者等-材料/生物医学等
+1/7
-
墨尔本大学(26年QS19)招全奖博士/CSC博士(补齐全奖)等-材料/生物电子/器官芯片等
+1/7
-
有需要发文章加分的吗？
+1/7
-
厦门大学航空航天学院智能制造课题组招2026年硕士、博士生若干名
+1/5
-
密苏里大学生物材料合成生物学博士后招聘
+1/4
-
美国普渡大学(Purdue University)生物化学系招聘博士后
+1/4
-
哈尔滨工业大学（深圳）赵怡潞课题组诚招博士后、2027学年博士生
+1/3
-
哈工大马樱教授招收2027级计算机类、集成电路类博士生
+1/3
-
某A股上市企业招聘一位年包50万以上高级研发工程师（助剂和粘结剂）
+1/1
-
哈尔滨工业大学（深圳）赵怡潞课题组诚招博士后、2027学年博士生
+1/1
-
密苏里大学生物材料合成生物学博士后招聘
+1/1
天使托
专家顾问 (职业作家)
-
专家经验: +57 - MicEPI: 13
- 应助: 95 (初中生)
- 贵宾: 0.263
- 金币: 16336.3
- 帖子: 3655
- 在线: 289.9小时
- 虫号: 441757
★ ★ ★ ★ ★
rainwander(金币+5, EPI+1): 呵呵，不错，给予鼓励 2011-04-09 17:54:09
bettyshan(金币+2): 谢谢给了我这么详细的回答~~~ 2011-04-10 15:32:42
rainwander(金币+5, EPI+1): 呵呵，不错，给予鼓励 2011-04-09 17:54:09
bettyshan(金币+2): 谢谢给了我这么详细的回答~~~ 2011-04-10 15:32:42
|
想请教一下做枯草芽孢杆菌的朋友，枯草芽孢杆菌敲除目前有没有无抗敲除的方法呢？（你的无抗是指没有抗生素吗？当然有了，不过你自己详细查查，抗生素其实起到的只是帮助筛选的作用，这样可以简化很多实验步骤） 那个WB700的菌是利用什么方法获得的，（这个由于我做的是P.aeruginosa,你说的这个菌还真是没有见过，不过你可以查阅一下相关的资料，绝对有的！） 为什么能够敲除那么多的基因？（不是为什么能够敲除那么多基因，而是看你做什么用，如果必要的话才会去敲除，如果这个基因和你所研究的课题没有任何关系，试问你会无缘无故去敲除它吗？NO，浪费时间！） 都是用的有抗敲除吗？（敲除基因只是研究基因功能的一个方法，当然了还有别的研究基因的方法，敲除也分很多种，插入突变，缺失突变orRNAi都可以的！） 如果总是用抗性的话那是不是只能敲除有限的基因啦？~~（并不是，只要你想敲除某个基因，载体构建好之后就可以进行敲除。。。。） ps:我一个一个给你解答！见括号！ |
2楼2011-04-09 17:49:20
3楼2011-04-09 19:07:06
4楼2011-04-09 20:08:45
5楼2013-03-15 22:51:54
6楼2013-03-15 22:53:05
7楼2014-05-14 00:39:40
8楼2015-10-26 20:17:05
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
|
1. 无痕敲除的方法很多，有基于mazF的方法，有基于温敏型质粒的方法，基于特异性重组位点的Lox-Cre方法或FRT-Flp法，当然还有最近很火热的CRISPR/cas9；仔细查文献，这些方法各有利弊； 2. 枯草的胞外蛋白酶很多，不利于外源蛋白的重组表达，所以要敲除好多个基因； 3. WB700的菌的来源可以去查加拿大学者SUI-LAM WONG教授的文献； 如（1）Engineering a Bacillus subtilis Expression-Secretion System with a Strain Deficient in Six Extracellular Proteases； 4. WB700菌株里面有3个基因是有抗性敲除，4个是无痕敲除； PS：我所在公司提供芽胞杆菌基因敲除的服务和多种芽孢杆菌的菌株质粒，感兴趣的可以详聊！ |
9楼2016-01-21 20:17:44
10楼2016-03-15 13:36:44