| 查看: 4931 | 回复: 9 | |||
| 本帖产生 1 个 MicEPI ，点击这里进行查看 | |||
[交流]
【求助/交流】枯草芽孢杆菌基因敲除~~
|
|||
|
想请教一下做枯草芽孢杆菌的朋友，枯草芽孢杆菌敲除目前有没有无抗敲除的方法呢？那个WB700的菌是利用什么方法获得的，为什么能够敲除那么多的基因？都是用的有抗敲除吗？ 如果总是用抗性的话那是不是只能敲除有限的基因啦？~~ 谢谢帮我解答啦~~~ |
回复此楼» 猜你喜欢
国自科送审了吗
已经有10人回复
-
博士招生
已经有5人回复
-
夜，静悄悄的
已经有8人回复
-
研究生做的很差，你们会让毕业吗？
已经有6人回复
-
26年博士申请自荐-电催化
已经有5人回复
-
2026博士或科研助理转27年博士
已经有5人回复
-
26年申博自荐-计算机视觉
已经有4人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 求助新问题，从“枯草芽孢杆菌摇瓶接种子罐时菌龄和芽孢率 ”说开去
已经有19人回复
- 地衣芽孢杆菌的基因敲除到底如何做啊？
已经有6人回复
- 枯草芽孢杆菌涂布平板不生长怎么回事？
已经有16人回复
- 【求助/交流】求工业生产杀死枯草芽孢杆菌的方法
已经有10人回复
- 【求助/交流】有关于枯草芽孢杆菌形态
已经有19人回复
- 【求助/交流】芽孢杆菌属的基因敲除方法
已经有12人回复
- 【求助/交流】枯草芽孢杆菌转外源基因
已经有18人回复
- 【求助/交流】如何使枯草芽孢杆菌产芽孢
已经有10人回复
- 【求助/交流】枯草芽孢杆菌的保存
已经有16人回复
- 【求助/交流】紧急求助枯草芽孢杆菌的选择培养基配方
已经有9人回复
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
-
坐标南京，诚租女友
+5/9321
-
香港城市大学 数据科学系+能源与环境学院 李堂华 课题组诚招全奖博士/博士后/研究助理
+3/189
-
东南大学废弃碳资源利用-杰青团队-27级博士生(提前入学)-及博后、科研助理招募
+1/176
-
上海嘉定周边俩小时车程
+5/170
-
国自然申报交流祈福
+4/134
-
中科大 冯伟 课题组招生-机器人界面控制、电学机械界面设计
+1/83
-
温州医科大学吴平课题组招聘博士后，年薪≥50W/年
+1/79
-
生命学部的面地青本子开始分发了么？
+1/61
-
google ai pro 会员/gemini分享
+1/33
-
北京邮电大学电子科学与技术招收博士
+1/30
-
急招-华南理工大学-26秋季博士生-生物质材料及电池方向
+1/29
-
2026年江西师范大学药学院陈芬儿院士课题组招收智能药学博士生
+1/28
-
香港大学化学系刘俊治课题组招聘博士后
+1/15
-
深圳理工大学-湖南大学项目招收钙钛矿方向博士生
+1/9
-
英国大学招收电子散热及数字孪生研究方向的博士生
+1/9
-
美国Vanderbilt University博士后招聘
+1/6
-
爱思维尔旗下LWT投稿
+1/3
-
双一流高校南林化学工程学院-国家级青年人才团队招2026级博士（最后一波）
+1/1
-
东北林业大学（211，双一流）招收高分子、化学、复合材料、生物质材料等方向博士生
+1/1
-
双一流天津工业大学电信学院李鸿强教授招收2026年申请审核制博士
+1/1
★ ★ ★ ★ ★
rainwander(金币+5, EPI+1): 呵呵，不错，给予鼓励 2011-04-09 17:54:09
bettyshan(金币+2): 谢谢给了我这么详细的回答~~~ 2011-04-10 15:32:42
rainwander(金币+5, EPI+1): 呵呵，不错，给予鼓励 2011-04-09 17:54:09
bettyshan(金币+2): 谢谢给了我这么详细的回答~~~ 2011-04-10 15:32:42
|
想请教一下做枯草芽孢杆菌的朋友，枯草芽孢杆菌敲除目前有没有无抗敲除的方法呢？（你的无抗是指没有抗生素吗？当然有了，不过你自己详细查查，抗生素其实起到的只是帮助筛选的作用，这样可以简化很多实验步骤） 那个WB700的菌是利用什么方法获得的，（这个由于我做的是P.aeruginosa,你说的这个菌还真是没有见过，不过你可以查阅一下相关的资料，绝对有的！） 为什么能够敲除那么多的基因？（不是为什么能够敲除那么多基因，而是看你做什么用，如果必要的话才会去敲除，如果这个基因和你所研究的课题没有任何关系，试问你会无缘无故去敲除它吗？NO，浪费时间！） 都是用的有抗敲除吗？（敲除基因只是研究基因功能的一个方法，当然了还有别的研究基因的方法，敲除也分很多种，插入突变，缺失突变orRNAi都可以的！） 如果总是用抗性的话那是不是只能敲除有限的基因啦？~~（并不是，只要你想敲除某个基因，载体构建好之后就可以进行敲除。。。。） ps:我一个一个给你解答！见括号！ |
2楼2011-04-09 17:49:20
3楼2011-04-09 19:07:06
4楼2011-04-09 20:08:45
5楼2013-03-15 22:51:54
6楼2013-03-15 22:53:05
7楼2014-05-14 00:39:40
8楼2015-10-26 20:17:05
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
|
1. 无痕敲除的方法很多，有基于mazF的方法，有基于温敏型质粒的方法，基于特异性重组位点的Lox-Cre方法或FRT-Flp法，当然还有最近很火热的CRISPR/cas9；仔细查文献，这些方法各有利弊； 2. 枯草的胞外蛋白酶很多，不利于外源蛋白的重组表达，所以要敲除好多个基因； 3. WB700的菌的来源可以去查加拿大学者SUI-LAM WONG教授的文献； 如（1）Engineering a Bacillus subtilis Expression-Secretion System with a Strain Deficient in Six Extracellular Proteases； 4. WB700菌株里面有3个基因是有抗性敲除，4个是无痕敲除； PS：我所在公司提供芽胞杆菌基因敲除的服务和多种芽孢杆菌的菌株质粒，感兴趣的可以详聊！ |
9楼2016-01-21 20:17:44
10楼2016-03-15 13:36:44