| 查看: 4546 | 回复: 9 | ||||
| 本帖产生 1 个 MicEPI ，点击这里进行查看 | ||||
[交流]
【求助/交流】枯草芽孢杆菌基因敲除~~
|
||||
|
想请教一下做枯草芽孢杆菌的朋友，枯草芽孢杆菌敲除目前有没有无抗敲除的方法呢？那个WB700的菌是利用什么方法获得的，为什么能够敲除那么多的基因？都是用的有抗敲除吗？ 如果总是用抗性的话那是不是只能敲除有限的基因啦？~~ 谢谢帮我解答啦~~~ |
回复此楼» 猜你喜欢
自荐读博
已经有5人回复
-
求个博导看看
已经有16人回复
-
上海工程技术大学张培磊教授团队招收博士生
已经有4人回复
-
上海工程技术大学【激光智能制造】课题组招收硕士
已经有5人回复
-
求助院士们，这个如何合成呀
已经有4人回复
-
临港实验室与上科大联培博士招生1名
已经有9人回复
-
需要合成515-64-0，50g，能接单的留言
已经有4人回复
-
写了一篇“相变储能技术在冷库中应用”的论文，论文内容以实验为主，投什么期刊合适？
已经有6人回复
-
带资进组求博导收留
已经有10人回复
-
最近几年招的学生写论文不引自己组发的文章
已经有11人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 求助新问题，从“枯草芽孢杆菌摇瓶接种子罐时菌龄和芽孢率 ”说开去
已经有19人回复
- 地衣芽孢杆菌的基因敲除到底如何做啊？
已经有6人回复
- 枯草芽孢杆菌涂布平板不生长怎么回事？
已经有16人回复
- 【求助/交流】求工业生产杀死枯草芽孢杆菌的方法
已经有10人回复
- 【求助/交流】有关于枯草芽孢杆菌形态
已经有19人回复
- 【求助/交流】芽孢杆菌属的基因敲除方法
已经有12人回复
- 【求助/交流】枯草芽孢杆菌转外源基因
已经有18人回复
- 【求助/交流】如何使枯草芽孢杆菌产芽孢
已经有10人回复
- 【求助/交流】枯草芽孢杆菌的保存
已经有16人回复
- 【求助/交流】紧急求助枯草芽孢杆菌的选择培养基配方
已经有9人回复
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
-
华中科技大学龚江研究员课题组诚招博士研究生、科研助理和博士后
+3/294
-
湖北大学食品安全研究团队诚招博士后
+1/175
-
限广州，征女友
+2/152
-
香港理工大学-应用生物与化学科技学系 招收2025年博士研究生
+2/110
-
上海大学管理学院阳发军教授课题组全职博士/博士后招聘启事
+1/87
-
Analytical Science Advances（Wiley出版社）长期征稿中...
+1/78
-
坐标北京不异地
+1/68
-
有南京的小伙伴吗，蹲个男朋友
+1/53
-
加拿大卡尔加里大学 量子通信和信息方向 硕士/博士招生
+1/53
-
西南交通大学前沿院碳中和与物质循环利用课题组招收博士生
+1/31
-
南京大学 统计与机器学习理论方向 博士招生
+1/30
-
盐湖所镁基储氢材料课题组招聘
+1/28
-
山东大学集成电路学院博士招生1名
+1/12
-
重庆大学前沿院，黄小洋教授课题组，招收2026年非均相催化方向学术博士2名
+1/11
-
南京林业大学”申请-考核”制学术学位博士研究生招生
+1/3
-
中科院精密测量院（原武汉物数所）诚招磁共振成像方向申请考核制博士（2026.1.9截止）
+1/2
-
所以当初说在欧美生活𣎴用讲人情世故的人怎么生活的
+1/2
-
测试
+1/2
-
[香港城市大学]电机工程系谭教授课题组-[二维材料光电子器件]-招收博士生
+1/1
-
北京理工大学-集成电路与电子学院-国家杰青团队-招博士后及科研助理
+1/1
天使托
专家顾问 (职业作家)
-
专家经验: +57 - MicEPI: 13
- 应助: 95 (初中生)
- 贵宾: 0.263
- 金币: 16382.3
- 帖子: 3648
- 在线: 288.2小时
- 虫号: 441757
★ ★ ★ ★ ★
rainwander(金币+5, EPI+1): 呵呵，不错，给予鼓励 2011-04-09 17:54:09
bettyshan(金币+2): 谢谢给了我这么详细的回答~~~ 2011-04-10 15:32:42
rainwander(金币+5, EPI+1): 呵呵，不错，给予鼓励 2011-04-09 17:54:09
bettyshan(金币+2): 谢谢给了我这么详细的回答~~~ 2011-04-10 15:32:42
|
想请教一下做枯草芽孢杆菌的朋友，枯草芽孢杆菌敲除目前有没有无抗敲除的方法呢？（你的无抗是指没有抗生素吗？当然有了，不过你自己详细查查，抗生素其实起到的只是帮助筛选的作用，这样可以简化很多实验步骤） 那个WB700的菌是利用什么方法获得的，（这个由于我做的是P.aeruginosa,你说的这个菌还真是没有见过，不过你可以查阅一下相关的资料，绝对有的！） 为什么能够敲除那么多的基因？（不是为什么能够敲除那么多基因，而是看你做什么用，如果必要的话才会去敲除，如果这个基因和你所研究的课题没有任何关系，试问你会无缘无故去敲除它吗？NO，浪费时间！） 都是用的有抗敲除吗？（敲除基因只是研究基因功能的一个方法，当然了还有别的研究基因的方法，敲除也分很多种，插入突变，缺失突变orRNAi都可以的！） 如果总是用抗性的话那是不是只能敲除有限的基因啦？~~（并不是，只要你想敲除某个基因，载体构建好之后就可以进行敲除。。。。） ps:我一个一个给你解答！见括号！ |
2楼2011-04-09 17:49:20
3楼2011-04-09 19:07:06
4楼2011-04-09 20:08:45
5楼2013-03-15 22:51:54
6楼2013-03-15 22:53:05
7楼2014-05-14 00:39:40
8楼2015-10-26 20:17:05
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
|
1. 无痕敲除的方法很多，有基于mazF的方法，有基于温敏型质粒的方法，基于特异性重组位点的Lox-Cre方法或FRT-Flp法，当然还有最近很火热的CRISPR/cas9；仔细查文献，这些方法各有利弊； 2. 枯草的胞外蛋白酶很多，不利于外源蛋白的重组表达，所以要敲除好多个基因； 3. WB700的菌的来源可以去查加拿大学者SUI-LAM WONG教授的文献； 如（1）Engineering a Bacillus subtilis Expression-Secretion System with a Strain Deficient in Six Extracellular Proteases； 4. WB700菌株里面有3个基因是有抗性敲除，4个是无痕敲除； PS：我所在公司提供芽胞杆菌基因敲除的服务和多种芽孢杆菌的菌株质粒，感兴趣的可以详聊！ |
9楼2016-01-21 20:17:44
10楼2016-03-15 13:36:44