24小时热门版块排行榜    

查看: 5173  |  回复: 9
本帖产生 1 个 MicEPI ,点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

bettyshan

木虫 (正式写手)


[交流] 【求助/交流】枯草芽孢杆菌基因敲除~~

想请教一下做枯草芽孢杆菌的朋友,枯草芽孢杆菌敲除目前有没有无抗敲除的方法呢?那个WB700的菌是利用什么方法获得的,为什么能够敲除那么多的基因?都是用的有抗敲除吗?
如果总是用抗性的话那是不是只能敲除有限的基因啦?~~

谢谢帮我解答啦~~~
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

» 抢金币啦!回帖就可以得到:

查看全部散金贴

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hkfgwww

银虫 (正式写手)


★ ★
rainwander(金币+2): 鼓励交流~~~ 2011-04-10 00:05:07
引用回帖:
Originally posted by bettyshan at 2011-04-09 11:41:28:
想请教一下做枯草芽孢杆菌的朋友,枯草芽孢杆菌敲除目前有没有无抗敲除的方法呢?那个WB700的菌是利用什么方法获得的,为什么能够敲除那么多的基因?都是用的有抗敲除吗?
如果总是用抗性的话那是不是只能敲除有 ...

关于敲除有大量的文献报道,要做到反敲除(即抗性基因的敲除)需要合适的质粒,例如温敏型质粒。

可以参考WB600的构建,其实就是在其基础上再敲除了一个蛋白酶,还有WB800也是一样。
4楼2011-04-09 20:08:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答
★ ★ ★ ★ ★
rainwander(金币+5, EPI+1): 呵呵,不错,给予鼓励 2011-04-09 17:54:09
bettyshan(金币+2): 谢谢给了我这么详细的回答~~~ 2011-04-10 15:32:42
想请教一下做枯草芽孢杆菌的朋友,枯草芽孢杆菌敲除目前有没有无抗敲除的方法呢?(你的无抗是指没有抗生素吗?当然有了,不过你自己详细查查,抗生素其实起到的只是帮助筛选的作用,这样可以简化很多实验步骤)

那个WB700的菌是利用什么方法获得的,(这个由于我做的是P.aeruginosa,你说的这个菌还真是没有见过,不过你可以查阅一下相关的资料,绝对有的!)
为什么能够敲除那么多的基因?(不是为什么能够敲除那么多基因,而是看你做什么用,如果必要的话才会去敲除,如果这个基因和你所研究的课题没有任何关系,试问你会无缘无故去敲除它吗?NO,浪费时间!)
都是用的有抗敲除吗?(敲除基因只是研究基因功能的一个方法,当然了还有别的研究基因的方法,敲除也分很多种,插入突变,缺失突变orRNAi都可以的!)
如果总是用抗性的话那是不是只能敲除有限的基因啦?~~(并不是,只要你想敲除某个基因,载体构建好之后就可以进行敲除。。。。)


ps:我一个一个给你解答!见括号!
2楼2011-04-09 17:49:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
★ ★
rainwander(金币+2): 呵呵,估计是没有,鼓励交流~~ 2011-04-10 00:05:39
lz有查过文献吗?

doi:10.1128/AEM.01156-08
3楼2011-04-09 19:07:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

serena1205

新虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
507313楼: Originally posted by 天使托 at 2011-04-09 17:49:20
想请教一下做枯草芽孢杆菌的朋友,枯草芽孢杆菌敲除目前有没有无抗敲除的方法呢?(你的无抗是指没有抗生素吗?当然有了,不过你自己详细查查,抗生素其实起到的只是帮助筛选的作用,这样可以简化很多实验步骤)

...

要是引入了抗性基因又怎么在敲除抗性基因呢
5楼2013-03-15 22:51:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 朋友圈看到的 +7 wangzilk 2026-08-18 9/450 2026-08-24 10:50 by cmrandy
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +11 koalala 2026-08-24 13/650 2026-08-24 10:49 by anjeeshine
[基金申请] 让我中一个面上吧! +13 大萍1987 2026-08-20 16/800 2026-08-24 10:23 by 太傻了
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +5 炎黄贵胄 2026-08-22 6/300 2026-08-24 06:34 by sincosx
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +11 kulium 2026-08-21 14/700 2026-08-24 02:12 by 流流伤
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +16 羊腰板 2026-08-21 17/850 2026-08-23 23:02 by tianxiaochun
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +4 process2012 2026-08-23 5/250 2026-08-23 19:58 by jurkat.1640
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办? +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
[基金申请] 今天放榜吗? +15 布布和一二 2026-08-19 16/800 2026-08-23 09:55 by 张春生
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +7 且听虎啸 2026-08-17 8/400 2026-08-22 21:55 by 医学老男孩
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +24 yaoyewhu2008 2026-08-20 26/1300 2026-08-22 17:43 by kammury
[基金申请] 人气不行了 +8 fansofjerry 2026-08-21 8/400 2026-08-22 16:30 by zyqchem
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +16 kkkl_v 2026-08-19 17/850 2026-08-22 16:12 by 阿布Abu
[基金申请] 时间戳今天,20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
[基金申请] 今日不放榜?网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +16 医学老男孩 2026-08-20 20/1000 2026-08-21 21:13 by Ldrop2023
[基金申请] 看来今天不会放榜了? +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[论文投稿] 投稿咨询 +5 wwm09 2026-08-17 7/350 2026-08-21 10:11 by 期刊论文帮手
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 估计是周四 +3 archvillain 2026-08-18 3/150 2026-08-21 01:48 by jnhyjjm
信息提示
请填处理意见