24小时热门版块排行榜    

查看: 5191  |  回复: 9
本帖产生 1 个 MicEPI ,点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

bettyshan

木虫 (正式写手)


[交流] 【求助/交流】枯草芽孢杆菌基因敲除~~

想请教一下做枯草芽孢杆菌的朋友,枯草芽孢杆菌敲除目前有没有无抗敲除的方法呢?那个WB700的菌是利用什么方法获得的,为什么能够敲除那么多的基因?都是用的有抗敲除吗?
如果总是用抗性的话那是不是只能敲除有限的基因啦?~~

谢谢帮我解答啦~~~
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

混合配搭

新虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
2楼: Originally posted by 天使托 at 2011-04-09 17:49:20
想请教一下做枯草芽孢杆菌的朋友,枯草芽孢杆菌敲除目前有没有无抗敲除的方法呢?(你的无抗是指没有抗生素吗?当然有了,不过你自己详细查查,抗生素其实起到的只是帮助筛选的作用,这样可以简化很多实验步骤)

...

你好,怎么构建基因敲除载体啊?
8楼2015-10-26 20:17:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答
★ ★ ★ ★ ★
rainwander(金币+5, EPI+1): 呵呵,不错,给予鼓励 2011-04-09 17:54:09
bettyshan(金币+2): 谢谢给了我这么详细的回答~~~ 2011-04-10 15:32:42
想请教一下做枯草芽孢杆菌的朋友,枯草芽孢杆菌敲除目前有没有无抗敲除的方法呢?(你的无抗是指没有抗生素吗?当然有了,不过你自己详细查查,抗生素其实起到的只是帮助筛选的作用,这样可以简化很多实验步骤)

那个WB700的菌是利用什么方法获得的,(这个由于我做的是P.aeruginosa,你说的这个菌还真是没有见过,不过你可以查阅一下相关的资料,绝对有的!)
为什么能够敲除那么多的基因?(不是为什么能够敲除那么多基因,而是看你做什么用,如果必要的话才会去敲除,如果这个基因和你所研究的课题没有任何关系,试问你会无缘无故去敲除它吗?NO,浪费时间!)
都是用的有抗敲除吗?(敲除基因只是研究基因功能的一个方法,当然了还有别的研究基因的方法,敲除也分很多种,插入突变,缺失突变orRNAi都可以的!)
如果总是用抗性的话那是不是只能敲除有限的基因啦?~~(并不是,只要你想敲除某个基因,载体构建好之后就可以进行敲除。。。。)


ps:我一个一个给你解答!见括号!
2楼2011-04-09 17:49:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
★ ★
rainwander(金币+2): 呵呵,估计是没有,鼓励交流~~ 2011-04-10 00:05:39
lz有查过文献吗?

doi:10.1128/AEM.01156-08
3楼2011-04-09 19:07:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hkfgwww

银虫 (正式写手)


★ ★
rainwander(金币+2): 鼓励交流~~~ 2011-04-10 00:05:07
引用回帖:
Originally posted by bettyshan at 2011-04-09 11:41:28:
想请教一下做枯草芽孢杆菌的朋友,枯草芽孢杆菌敲除目前有没有无抗敲除的方法呢?那个WB700的菌是利用什么方法获得的,为什么能够敲除那么多的基因?都是用的有抗敲除吗?
如果总是用抗性的话那是不是只能敲除有 ...

关于敲除有大量的文献报道,要做到反敲除(即抗性基因的敲除)需要合适的质粒,例如温敏型质粒。

可以参考WB600的构建,其实就是在其基础上再敲除了一个蛋白酶,还有WB800也是一样。
4楼2011-04-09 20:08:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[博后之家] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 7/350 2026-08-30 12:13 by l0VvVHGBGRLv
[找工作] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 9/450 2026-08-30 11:41 by l0VvVHGBGRLv
[考研] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +6 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 9/450 2026-08-30 11:30 by l0VvVHGBGRLv
[基金申请] 国社科又开始会评了,不知道这次命运如何 +3 雨打竹帘 2026-08-30 3/150 2026-08-30 09:43 by KNIGHT2011
[考博] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 jCd0dEvKHShX 2026-08-29 5/250 2026-08-30 08:33 by ZPa0EcMwuECS
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 G6APbkg8SA6w 2026-08-29 4/200 2026-08-30 07:17 by ZPa0EcMwuECS
[考博] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 5/250 2026-08-30 07:05 by ZPa0EcMwuECS
[硕博家园] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 5/250 2026-08-30 06:55 by ZPa0EcMwuECS
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 6/300 2026-08-30 06:22 by ZPa0EcMwuECS
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗? +4 349506619 2026-08-28 4/200 2026-08-29 22:41 by alongwaytogo
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高,自己申请怎么就这么难 +12 Kittylucky 2026-08-27 13/650 2026-08-29 00:04 by superceng
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 哪位高人中了,把查询到的截图贴出来让我看看,让我长长见识 +5 yuleib84 2026-08-26 6/300 2026-08-28 00:02 by yudaoqian88
[基金申请] 面上合作单位盖章 +5 ssyjh 2026-08-27 5/250 2026-08-27 20:50 by gdfollow
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +23 koalala 2026-08-24 26/1300 2026-08-26 14:29 by 宝贝虫子
[基金申请] 出来了 +9 trojank 2026-08-26 9/450 2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 国合现在查不到了吗? +10 chengyan1220 2026-08-24 20/1000 2026-08-26 08:57 by peasantsprig
[基金申请] 某些机构,以效率低为荣,以效率低作为存在感 +9 yuleib84 2026-08-25 10/500 2026-08-25 17:14 by alexon
信息提示
请填处理意见