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yonghuixie

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xieyonghui

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 帖航 at 2015-03-20 10:44:12
先看你的蛋白,如果是本来就有正确结构的蛋白是不需要加DTT的,如果是变性的蛋白,并且其一级结构中含半胱氨酸,那么缓冲液中加DTT,并且逐渐减少DTT浓度。DTT是防止错误的二硫桥形成的,蛋白会先向正确结构形成二硫 ...

就是在蛋白复性,做尿素梯度复性的时候透析液DTT要怎么控制?大概多少终浓度,望指教!
4楼2016-05-07 15:56:58
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qwbio123

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
DTT还原性,是为了维持蛋白的构想,防止蛋白被其他的物质氧化了,但蛋白透析液或者脱盐Buffer中要加入DTT吗这个问题我也不清楚,这个资源详细介绍了DTT的性质,你可以看一下。http://www.bioconsumable.com/cn/br/bm/01/bm0844958572016290.htm
2楼2015-03-19 11:10:19
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帖航

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
先看你的蛋白,如果是本来就有正确结构的蛋白是不需要加DTT的,如果是变性的蛋白,并且其一级结构中含半胱氨酸,那么缓冲液中加DTT,并且逐渐减少DTT浓度。DTT是防止错误的二硫桥形成的,蛋白会先向正确结构形成二硫键,但是这个过程较为缓慢,如果直接不加还原剂,那么正确的和错误的二硫键都会形成。所以慢慢的降低DTT,使蛋白形成正确的结构而不至于形成错误的二硫桥。
不过你这问题光说透析,不说什么目的不太好回答。
3楼2015-03-20 10:44:12
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xieyonghui

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by qwbio123 at 2015-03-19 11:10:19
DTT还原性,是为了维持蛋白的构想,防止蛋白被其他的物质氧化了,但蛋白透析液或者脱盐Buffer中要加入DTT吗这个问题我也不清楚,这个资源详细介绍了DTT的性质,你可以看一下。http://www.bioconsumable.com/cn/br/b ...

学习了,谢谢
5楼2016-05-07 15:58:39
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