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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白/酶 » 蛋白纯化后要加DTT吗？
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yonghuixie

禁虫 (小有名气)
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1楼 2015-03-19 09:53:23
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xieyonghui

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 帖航 at 2015-03-20 10:44:12
先看你的蛋白，如果是本来就有正确结构的蛋白是不需要加DTT的，如果是变性的蛋白，并且其一级结构中含半胱氨酸，那么缓冲液中加DTT，并且逐渐减少DTT浓度。DTT是防止错误的二硫桥形成的，蛋白会先向正确结构形成二硫 ...

就是在蛋白复性，做尿素梯度复性的时候透析液DTT要怎么控制？大概多少终浓度，望指教！
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4楼2016-05-07 15:56:58
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qwbio123

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
DTT还原性，是为了维持蛋白的构想，防止蛋白被其他的物质氧化了，但蛋白透析液或者脱盐Buffer中要加入DTT吗这个问题我也不清楚，这个资源详细介绍了DTT的性质，你可以看一下。http://www.bioconsumable.com/cn/br/bm/01/bm0844958572016290.htm
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2楼2015-03-19 11:10:19
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帖航

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
先看你的蛋白，如果是本来就有正确结构的蛋白是不需要加DTT的，如果是变性的蛋白，并且其一级结构中含半胱氨酸，那么缓冲液中加DTT，并且逐渐减少DTT浓度。DTT是防止错误的二硫桥形成的，蛋白会先向正确结构形成二硫键，但是这个过程较为缓慢，如果直接不加还原剂，那么正确的和错误的二硫键都会形成。所以慢慢的降低DTT，使蛋白形成正确的结构而不至于形成错误的二硫桥。
不过你这问题光说透析，不说什么目的不太好回答。
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3楼2015-03-20 10:44:12
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xieyonghui

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by qwbio123 at 2015-03-19 11:10:19
DTT还原性，是为了维持蛋白的构想，防止蛋白被其他的物质氧化了，但蛋白透析液或者脱盐Buffer中要加入DTT吗这个问题我也不清楚，这个资源详细介绍了DTT的性质，你可以看一下。http://www.bioconsumable.com/cn/br/b ...

学习了，谢谢
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5楼2016-05-07 15:58:39
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