24小时热门版块排行榜    

查看: 3146  |  回复: 6
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

羲和羲羲和

金虫 (小有名气)

[求助] WB蛋白显影结果问题求助 已有2人参与

蛋白显影后,胶片上有的地方空白,什么都没有,背景没有,也没有条带。到底是什么原因呢?
第一次显影后结果不理想,出现上述现象,无法观察整行条带。。
之后,用stripping buffer 洗了之后,重新孵育一抗二抗,显影后,发现之前有些空白的地方又有了背景,这就说明空白不是转膜之前决定的呀,一抗二抗也是无气泡孵育呀,难道是显影时有气泡吗?可是,显影时候的气泡是必须得仔细排掉的。玻板下面若是有发光液浸入有气泡是不影响的,有验证过,那还有什么原因呢?。。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huiting410

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

显影液有问题,下次先用一个已知蛋白做个对照,如果已知蛋白都做不出来就一定是显影液的问题。而且第一次曝光都什么也没有,就没必要strip了,你strip后有背景很显然就是没洗干净。
6楼2015-07-31 05:40:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

zhuzijack

铜虫 (文坛精英)


【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
建议确定二抗是否过期,就是直接用二抗来显影,如果可以再验证一抗与二抗的结合,即将一抗固定于膜上然后加二抗,如此类推,一步步找到原因
2楼2015-03-18 16:30:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

羲和羲羲和

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zhuzijack at 2015-03-18 16:30:42
建议确定二抗是否过期,就是直接用二抗来显影,如果可以再验证一抗与二抗的结合,即将一抗固定于膜上然后加二抗,如此类推,一步步找到原因

谢谢回复。
如果二抗过期不是没有和一抗结合吗?那不就显不出东西吗?我这是片上不定点有空白呀。

[ 发自小木虫客户端 ]
3楼2015-03-19 08:41:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

奋进的女孩

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 羲和羲羲和 at 2015-03-19 08:41:06
谢谢回复。
如果二抗过期不是没有和一抗结合吗?那不就显不出东西吗?我这是片上不定点有空白呀。
...

我也想知道原因是什么造成的???
4楼2015-07-24 12:16:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 275求调剂 +3 Micky11223 2026-03-25 5/250 2026-03-25 22:32 by barlinike
[考研] 312求调剂 +5 上岸吧ZJY 2026-03-22 7/350 2026-03-25 22:20 by 544594351
[考研] 材料求调剂 +4 .m.. 2026-03-25 4/200 2026-03-25 21:30 by peike
[考研] 334分 一志愿武理-080500 材料求调剂 +4 李李不服输 2026-03-25 4/200 2026-03-25 21:26 by 星空星月
[考研] 化学调剂一志愿上海交通大学336分-本科上海211 +3 小鱼爱有机 2026-03-25 3/150 2026-03-25 20:13 by qingfeng258
[考研] 材料与化工304求B区调剂 +3 邱gl 2026-03-25 3/150 2026-03-25 19:03 by Ainin_
[考研] 材料与化工考研调剂 +9 孅華 2026-03-22 9/450 2026-03-25 13:09 by cmz0325
[考研] 求调剂一志愿武汉理工大学材料工程(085601) +5 WW.' 2026-03-23 7/350 2026-03-24 14:50 by sprinining
[考研] 344求调剂 +3 desto 2026-03-24 3/150 2026-03-24 10:09 by 搏击518
[考研] 一志愿河北工业大学0817化工278分求调剂 +7 jhybd 2026-03-23 12/600 2026-03-24 09:03 by jhybd
[考研] 276求调剂。有半年电池和半年高分子实习经历 +9 材料学257求调剂 2026-03-23 10/500 2026-03-24 07:36 by wangy0907
[考研] 269求调剂 +4 我想读研11 2026-03-23 4/200 2026-03-23 21:25 by pswait
[考研] 生物学一志愿985,分数349求调剂 +6 zxts12 2026-03-21 9/450 2026-03-23 18:37 by macy2011
[考研] 070300,一志愿北航320求调剂 +3 Jerry0216 2026-03-22 5/250 2026-03-23 09:16 by 。。堂堂
[考研] 一志愿华中农业071010,总分320求调剂 +5 困困困困坤坤 2026-03-20 6/300 2026-03-22 17:41 by hxsm
[考研] 319求调剂 +4 小力气珂珂 2026-03-20 4/200 2026-03-22 15:53 by ColorlessPI
[考研] 求调剂 +7 Auroracx 2026-03-22 7/350 2026-03-22 12:38 by 素颜倾城1988
[基金申请] 学校已经提交到NSFC,还能修改吗? 40+4 babangida 2026-03-19 9/450 2026-03-21 16:12 by babangida
[考研] 求调剂 +3 eation27 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:32 by JourneyLucky
[考研] 招收调剂硕士 +4 lidianxing 2026-03-19 12/600 2026-03-20 12:25 by lidianxing
信息提示
请填处理意见