应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 用genomic DNA 为模板做PCR，为什么有的时候能p出来有的时候不能？求指导
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
111/2返回列表12下一页
查看: 3724  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

诺诺不可欺

银虫 (初入文坛)

[求助] 用genomic DNA 为模板做PCR，为什么有的时候能p出来有的时候不能？求指导 已有6人参与

PCR条件相同，原料相同，也做过梯度的，为什么之前能p出来，现在是怎么也p不出来?

用genomic DNA 为模板做PCR，为什么有的时候能p出来有的时候不能？求指导
2014-12 扩增.jpg


用genomic DNA 为模板做PCR，为什么有的时候能p出来有的时候不能？求指导-1
2015-1  DNA 扩增.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2015-03-14 09:10:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

一砖头飘死

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
诺诺不可欺: 金币+1 2015-03-15 21:33:30
你这结果图，什么条带也没有，看看退火温度是不是过高，加样的时候是否确定加入，引物有没有问题，等等一些小细节吧
赞一下 回复此楼
2楼2015-03-14 09:37:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenguestc

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
诺诺不可欺: 金币+1 2015-03-15 21:33:38
用高保真酶，优化引物退火温度
赞一下 回复此楼
3楼2015-03-14 11:27:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gnot_nail

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
诺诺不可欺: 金币+1 2015-03-15 21:33:53
模板会不会降解了？之前成功是多久之前的，会不会模板本身浓度低然后没保存好，就降解了。
赞一下 回复此楼
4楼2015-03-14 13:21:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

诺诺不可欺

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by chenguestc at 2015-03-14 11:27:33
用高保真酶，优化引物退火温度

用的是高保真的酶，退火温度从45，50，55，58，60都试过了都没有P出来
赞一下 回复此楼
5楼2015-03-15 21:27:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

诺诺不可欺

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by gnot_nail at 2015-03-14 13:21:12
模板会不会降解了？之前成功是多久之前的，会不会模板本身浓度低然后没保存好，就降解了。

不应该，我重新提取过一次模板了也没p出来
我再跑个电泳看看模板试试
赞一下 回复此楼
6楼2015-03-15 21:31:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

诺诺不可欺

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 一砖头飘死 at 2015-03-14 09:37:21
你这结果图，什么条带也没有，看看退火温度是不是过高，加样的时候是否确定加入，引物有没有问题，等等一些小细节吧

退火温度从45，50，55，58，60都试过了都没出来
但是之前是58度P出来的
赞一下 回复此楼
7楼2015-03-15 21:33:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
模板降解
试剂过期或者污染（酶的选择也是一方面 建议热启动酶，高保真酶如果扩增没有针对一个碱基的，一般不要用，可能会降解模板）
如果梯度已经尝试多次还没有成功，就放弃。赶快考虑其他因素
赞一下 回复此楼
todayisdifficult，tomorrowismoredifficult，butthedayaftertomorrowisbeautiful
8楼2015-03-16 10:57:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuman0709

铁虫 (初入文坛)
我现在也是这个问题，不知咋办？
赞一下 回复此楼
9楼2015-03-17 08:49:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

焦卓磊

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
诺诺不可欺: 金币+1, ★有帮助 2015-05-13 08:22:50
我当时做了个镁离子浓度梯度，就扩出来了

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
为自己未来奋斗
10楼2015-03-17 09:21:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 诺诺不可欺 的主题更新
111/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085404 293求调剂 +5 勇远库爱314 2026-04-06 6/300 2026-04-07 09:56 by dick_runner
[考研] 085602化学工程268分蹲调剂 +10 月照花林。 2026-04-01 10/500 2026-04-07 08:51 by 晴空210210
[考研] 287分求调剂 有专利国奖一志愿哈工大085406 +6 白易辰 2026-04-06 7/350 2026-04-06 22:46 by 875465
[考研] 生物学学硕求调剂：351分一志愿南京师范大学生物学专业 +6 …～、王…～ 2026-04-06 7/350 2026-04-06 18:54 by macy2011
[考研] 土木水利专硕276分求调剂 +3 我想上学！！6 2026-04-05 6/300 2026-04-06 18:51 by 我想上学！！6
[考研] 求助 +3 卡卡东88 2026-04-06 4/200 2026-04-06 15:28 by going home
[考研] 281求调剂 +8 椰子蘑菇 2026-04-06 8/400 2026-04-06 10:38 by 蓝云思雨
[考研] 315求调剂 +14 欣喜777 2026-04-04 15/750 2026-04-06 06:25 by houyaoxu
[考研] 283求调剂 +5 baiiyu 2026-04-05 6/300 2026-04-05 20:35 by 啵啵啵0119
[考研] 一志愿北京化工大学，初试成绩350求调剂 +9 沿岸?贝壳 2026-04-04 14/700 2026-04-05 01:09 by 沿岸?贝壳
[考研] 可跨专业调剂 +3 周的得地 2026-04-04 6/300 2026-04-04 22:21 by barlinike
[考研] 材料调剂 +10 懒羊羊轻置玉臀 2026-04-02 11/550 2026-04-04 21:56 by laoshidan
[考研] 26调剂 086003 +6 失活的细胞 2026-04-04 6/300 2026-04-04 09:50 by zhangdingwa
[考研] 313求调剂 +3 ～微微凉～ 2026-04-03 3/150 2026-04-03 11:25 by 啵啵啵0119
[考研] 316求调剂 +14 舟自梗 2026-04-01 18/900 2026-04-03 10:28 by linyelide
[考研] 求调剂22408 288分 +5 new382 2026-04-02 5/250 2026-04-03 09:13 by 醉在风里
[考研] 326求调剂 +10 崽崽仔 2026-04-02 10/500 2026-04-03 09:08 by 帕尔马拉特
[考研] 一志愿复旦材料，英一专硕，总分357调剂 +4 1050389037 2026-04-02 5/250 2026-04-02 21:40 by dongzh2009
[考研] 292求调剂 +17 木虫er12138 2026-04-01 17/850 2026-04-01 21:37 by 七度不信任
[考研] 材料调剂 +11 一样YWY 2026-03-31 11/550 2026-04-01 11:35 by wangjy2002
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭