24小时热门版块排行榜    

查看: 9661  |  回复: 8
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

guoguo201209

新虫 (小有名气)

[求助] 为何有的PCR实验,延伸温度用60度? 已有3人参与

查阅了相关文献,同一种酶,为何扩增一对引物用的延伸温度是68度,而扩增另一对引物强调延伸温度是60度才能扩增出来。延伸温度不是根据酶来确定的吗?为何要改变才能扩增出来呢?求大侠指点
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by guoguo201209 at 2015-03-17 17:28:13
延伸时间与模板长度有关吧...

对啊,当然啦。我说了丫
todayisdifficult,tomorrowismoredifficult,butthedayaftertomorrowisbeautiful
9楼2015-03-18 08:46:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

lovelydong

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
guoguo201209(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2015-03-02 19:39:48
PCR的延伸温度是由引物来决定的,引物的长短、GC的含量都会影响到退火温度。在设计引物时候,设计软件就会帮助计算出延伸温度。但是延伸温度要接近酶的活性温度,才能保证高效扩增。所有在设计引物时候要考虑到。
2楼2015-03-02 17:31:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
延伸温度由引物决定,PCR中,只要酶用的好,设计引物的时候则无需考虑酶的问题。酶的活性温度不需要考虑,因为用于PCR的酶起码的条件也是耐热酶(普通Taq或热启动Taq酶),不然怎么扩增呢
todayisdifficult,tomorrowismoredifficult,butthedayaftertomorrowisbeautiful
3楼2015-03-03 09:50:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

guoguo201209

新虫 (小有名气)

各位大侠说的是退火温度由引物决定的,我现在问的是延伸温度,也跟引物有关?

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
4楼2015-03-03 15:24:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +8 yuleib84 2026-08-19 9/450 2026-08-21 09:45 by climap
[基金申请] 让我中一个面上吧! +10 大萍1987 2026-08-20 12/600 2026-08-21 09:31 by 020100099
[基金申请] 放榜前的不淡定 40+4 snowwithsea 2026-08-19 13/650 2026-08-21 08:30 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 估计是周四 +3 archvillain 2026-08-18 3/150 2026-08-21 01:48 by jnhyjjm
[基金申请] 科研孤儿太难了 +14 我4大白菜 2026-08-20 15/750 2026-08-20 22:33 by 袁向阳007
[基金申请] 时间戳又变了 +12 wuchongjun 2026-08-20 17/850 2026-08-20 20:05 by spzhao
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +10 zju2000 2026-08-16 11/550 2026-08-20 20:02 by cl479861084
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +14 kkkl_v 2026-08-19 15/750 2026-08-20 08:21 by sunzitan
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +11 ziyangfang 2026-08-19 13/650 2026-08-19 21:28 by aasahr
[教师之家] 为什么余额宝的年化利率越来越低?主要原因有哪些? +5 瞬息宇宙 2026-08-15 5/250 2026-08-19 20:23 by super2002521
[基金申请] 今天放榜吗? +14 布布和一二 2026-08-19 15/750 2026-08-19 18:07 by gltch
[基金申请] 2027广东省杰青 +4 奶牛小黑 2026-08-15 10/500 2026-08-19 11:02 by wanfengnew
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[基金申请] 快农历七夕节了,轻松一下,男人悄悄话,女施主请不要进来。 +6 Tide man 2026-08-14 7/350 2026-08-19 09:56 by ZJTJZ
[基金申请] 什么时候开奖? +6 CrisMessi 2026-08-18 6/300 2026-08-19 08:06 by Equinoxhua
[论文投稿] 投稿咨询 +4 wwm09 2026-08-17 6/300 2026-08-18 15:36 by wwm09
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +14 archvillain 2026-08-15 26/1300 2026-08-18 13:37 by phantomgost
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +6 angus9576 2026-08-17 11/550 2026-08-17 23:57 by angus9576
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
信息提示
请填处理意见