| 查看: 3885 | 回复: 1 | |||
[交流]
大分子量蛋白WESTERN BLOT问题讨论与求助
|
|
请问，有没有人做过140-220KD的蛋白，大概条件是什么样的？需要注意什么？ 我现在做140KD-220KD蛋白，一直做不出来，但是GAPDH还是可以出来。刚开始转膜不好，现在转膜后，GEL考染后基本都转到了膜上，但是目的蛋白依旧没条带，泳道曝光长了就全部糊掉，感觉有又是没有。 现在想问的问题是：1、β-巯基乙醇的浓度加错了，会不会造成蛋白分不开？比如38KD和42KD的就会连上？单独孵育两个抗体，相同的位置都有条带，一起孵育的话，条带加粗。 2、β-巯基乙醇的浓度会不会是造成泳道糊掉的原因？ 3、在pcr仪中denature是不是不彻底？95° 6min ps:一抗没问题，浓度也加大了。并且应该是有目的蛋白的。 求大神指点，万分的感谢！！！ |
回复此楼» 猜你喜欢
假如你的研究生提出不合理要求
已经有7人回复
-
实验室接单子
已经有4人回复
-
全日制（定向）博士
已经有4人回复
-
对氯苯硼酸纯化
已经有3人回复
-
求助:我三月中下旬出站，青基依托单位怎么办？
已经有12人回复
-
不自信的我
已经有12人回复
-
所感
已经有4人回复
-
要不要辞职读博？
已经有7人回复
-
北核录用
已经有3人回复
-
26申博（荧光探针方向，有机合成）
已经有4人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- P糖蛋白的western blot条件
已经有5人回复
- western blot 图片很奇怪 求解
已经有5人回复
- 急！500kD 蛋白western 求助
已经有17人回复
- 如何区分蛋白质分子量的大小
已经有9人回复
- 蛋白分子量大小与它的表达量相关吗？
已经有4人回复
- EGFR western蛋白两条带
已经有5人回复
- westernblot 目标蛋白无条带
已经有9人回复
- 小分子蛋白的western blotting注意事项
已经有12人回复
- western实验中大分子量的蛋白如何鉴定
已经有5人回复
- 蛋白表达分子量偏大
已经有25人回复
- 求助EGFP蛋白的western及免疫荧光问题！！！！！急急急！！！！！
已经有4人回复
- 10kd 和100kd的蛋白同时做western blot
已经有11人回复
- 104KD的蛋白，做western blot电泳和转膜时间及膜的选择？
已经有21人回复
- 请教大豆种子蛋白提取方法用于western blot
已经有5人回复
- 14kd的蛋白，做westernblot，电转条件是怎样的
已经有11人回复
- western 中，目的蛋白没有，但是Marker 暴出来了，什么原因啊
已经有16人回复
- Western Blot出现问题
已经有19人回复
- 有没有人用Western blot在做17kDa蛋白质,求经验！！！
已经有22人回复
- 一般分子量多大的蛋白能顺利表达？
已经有6人回复
- 求助，Western-Blot转膜不成功
已经有22人回复
- western blot中蛋白质转印问题
已经有17人回复
- Western Blot实验的蛋白条带都连在一起
已经有37人回复
- 请教western blot 时蛋白稀释液情况
已经有4人回复
- 【分享】新手上路 Western blot问题集合
已经有6人回复
- 【求助/交流】请教大分子量蛋白western blot转膜的一些问题
已经有10人回复
- 原创首发：Tips for Western Blot-一些小技巧而已
已经有13人回复
2楼2016-05-27 13:02:28