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非变性PAGE胶跑PCR产物结果有问题
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erw82849478
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专业: 作物分子育种
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]
非变性PAGE胶跑PCR产物结果有问题
已有1人参与
最近做SSR要跑非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,前几天师兄给跑了一板效果不错,但是我自己跑了几板条带都出现了类似重影的现象,连MARKER都出现了重影,跪求大神解答啊。
最左边是2000的MARKER(没别的了),可以看到100BP的位置出现了两条带,250BP的位置出现了三条带,右边的PCR产物也是有重影而且都有两条带连在一起并且中间看起来怪怪的,这是啥情况。(我加样缓冲液是用去离子甲酰胺配的,查了一下好像是用错了,但是师兄给跑的还好,而且MARKER都跑出了几条带,不知道是什么问题了)
Screenshot_2015-01-28-20-17-26.png
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1楼
2015-01-28 20:39:12
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BJL1990
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虫号: 3426923
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专业: 植物生理与生化
我和你的情况一样,请问楼主的问题解决了吗?
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6楼
2015-10-25 21:15:22
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wanglei8851
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虫号: 1752183
注册: 2012-04-12
性别: GG
专业: 果树学
偶尔也曾出现过一两次,不过没这么明显,请问上样量多少?我用的长板102齿的点1.2微升刚好,点样量多了带不太好看。
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2楼
2015-01-30 15:48:56
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gangouyang
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性别: GG
专业: 生物化学
【答案】应助回帖
感谢参与,应助指数 +1
胶的浓度高了,分辨率变高了,出现了高级结构,二聚体之类的。
此法请参考一下我的文章或者论文。
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3楼
2015-01-30 17:37:28
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aster4231
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注册: 2011-06-01
专业: 观赏园艺学
我想问一下,你的胶是怎么保存的,感觉好像不是用保鲜膜封上的啊。我用保鲜膜,封的皱皱的,而你的看上去很平展,很美观,求指导
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4楼
2015-04-05 09:28:53
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