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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 非变性PAGE胶跑PCR产物结果有问题
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erw82849478

新虫 (初入文坛)

[求助] 非变性PAGE胶跑PCR产物结果有问题 已有1人参与

最近做SSR要跑非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳，前几天师兄给跑了一板效果不错，但是我自己跑了几板条带都出现了类似重影的现象，连MARKER都出现了重影，跪求大神解答啊。
最左边是2000的MARKER（没别的了），可以看到100BP的位置出现了两条带，250BP的位置出现了三条带，右边的PCR产物也是有重影而且都有两条带连在一起并且中间看起来怪怪的，这是啥情况。（我加样缓冲液是用去离子甲酰胺配的，查了一下好像是用错了，但是师兄给跑的还好，而且MARKER都跑出了几条带，不知道是什么问题了）

非变性PAGE胶跑PCR产物结果有问题
Screenshot_2015-01-28-20-17-26.png
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1楼 2015-01-28 20:39:12
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wanglei8851

银虫 (小有名气)
偶尔也曾出现过一两次，不过没这么明显，请问上样量多少？我用的长板102齿的点1.2微升刚好，点样量多了带不太好看。
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2楼2015-01-30 15:48:56
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gangouyang

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
胶的浓度高了，分辨率变高了，出现了高级结构，二聚体之类的。
此法请参考一下我的文章或者论文。
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3楼2015-01-30 17:37:28
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aster4231

新虫 (初入文坛)
我想问一下，你的胶是怎么保存的，感觉好像不是用保鲜膜封上的啊。我用保鲜膜，封的皱皱的，而你的看上去很平展，很美观，求指导
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4楼2015-04-05 09:28:53
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山不转宁转

新虫 (初入文坛)
楼主我也是和你一样的情况，想问你解决了吗？
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5楼2015-04-05 23:16:24
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BJL1990

新虫 (初入文坛)
我和你的情况一样，请问楼主的问题解决了吗？
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6楼2015-10-25 21:15:22
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