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请教关于PAGE胶跑DNA问题 已有1人参与
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请教几点关于PAGE胶跑DNA问题： 1 100-700bp的DNA用PAGE胶浓度多大为好？ 2 丙烯酰胺/甲叉双丙烯酰胺比例多少为好？29:1 or 37.5:1 3 跑完的胶用stain dye 或者gel red （1:10000）染色20min，条带会有拖尾，有时候胶孔有滞留的东东，是什么原因呢？（样品中有DNA和蛋白和离子），谢谢 |
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【答案】应助回帖
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感谢参与，应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励应助！ 2014-07-19 20:51:33
感谢参与，应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励应助！ 2014-07-19 20:51:33
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聚丙烯酰胺凝胶孔径的大小是由丙烯酰胺的浓度决定的，不同浓度丙烯酰胺和DNA的 有效分离范围见表 丙烯酰胺(%) 有效分离范围(bp) 3.5 100～2000 5.0 80～500 8.0 60～400 12.0 40～200 15.0 25～150 20.0 10～100 所以想达到对DNA最佳分辨,与胶的浓度和合适的电压,电泳时间有关.不能绝对的说浓度越高,分辨的越好,因为电压和电泳时间也很重要,建议您看一下这个链接http://www.technew.cn/?m=news&s=newsd&id=6900 |
2楼2014-07-19 15:41:47
3楼2014-07-21 20:29:01
4楼2014-07-21 22:06:20
5楼2014-07-22 20:28:23
