应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 请问两个关于denature PAGE的问题~
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
81/1返回列表
查看: 1648  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

zsa513

新虫 (初入文坛)

[交流] 请问两个关于denature PAGE的问题~ 已有2人参与

我用denature PAGE(urea)跑DNA, 感觉迁移率非常的慢，这是正常的么？我平时跑蛋白顶多1个小时，这样感觉至少要2，3个小时，我跑的DNA片段很小20-70bp，用的12%的胶，请问大牛大概要跑多长时间啊？

还有一个问题，就是我跑觉的时候，current的电压会随着时间变动，我已经选了电泳constant了。以前从来不会变的。这是胶或者buffer有问题么？还是电泳仪mode的问题？还是说跑这种电泳就是会这样？

求大牛解释！多谢！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-07-03 11:41:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhoujunnju

至尊木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
1949stone(金币+1): 鼓励 2011-07-03 18:12:15
恒定电压试一试，胶可以10%，buffer可以用新制备的
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2011-07-03 15:54:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zsa513

新虫 (初入文坛)
我电压已经选的恒定的了，但是跑起来，就会变

我以前跑胶也是用的12%的，可是跑蛋白的时候速度没问题啊，改泡DNA的时候配方是变了，可是胶的浓度没变啊

继续求解释~
赞一下 回复此楼
3楼2011-07-04 01:51:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西瓜

荣誉版主 (知名作家)
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
dhd997(金币+3): 2011-07-04 18:06:56
引用回帖:
Originally posted by zsa513 at 2011-07-04 01:51:15:
我电压已经选的恒定的了，但是跑起来，就会变

我以前跑胶也是用的12%的，可是跑蛋白的时候速度没问题啊，改泡DNA的时候配方是变了，可是胶的浓度没变啊

继续求解释~

缓冲液的问题或者是电泳仪设定的问题。

电泳液的体系是随着电泳的进行是不断变化的，可以设定恒压或者恒流，但是恒压时，电流是随着电泳进行不断变大的，反之亦然。
电泳仪有保护功能，设定恒压时，设定的电流为允许的最大电流，当电流超过这个最大值时会自动切换成恒流，此时随着电泳进行变化的就是电压了。

你看看一般跑DNA时的电压是多少，可能是跑蛋白的参数不适合于DNA，可以把最大电流值设置大一些。如果参数设置没错，那就是缓冲液不行，重新配缓冲液。
赞一下(2人) 回复此楼
4楼2011-07-04 09:46:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zsa513

新虫 (初入文坛)
dhd997: 可以引用回复 2011-07-04 18:07:16
非常感谢，前一个问题，请问也能帮我解释下么？
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2011-07-04 11:32:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西瓜

荣誉版主 (知名作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
Originally posted by zsa513 at 2011-07-04 11:32:49:
非常感谢，前一个问题，请问也能帮我解释下么？

PAGE胶跑DNA我没做过，等高人解答吧，呵呵。权当顶贴了
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2011-07-04 20:24:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhoujunnju

至尊木虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
dhd997(金币+2): good 2011-07-06 07:38:44
这个与你电泳胶的温度也有关系的，温度高速度快点，温度低点速度慢。不过20-70bp建议用10%的胶差不多。天然电泳一般2小时左右，变性一般半小时。不过后者的电压也高。我天然是160V，变性350V。
赞一下(2人) 回复此楼
7楼2011-07-05 23:55:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zsa513

新虫 (初入文坛)
dhd997: 对于你想让谁回答你，可以引用回复。也可以在一楼编辑 2011-07-07 07:44:25
谢谢，可是为什么变性的电压需要的高呢？
赞一下(1人) 回复此楼
8楼2011-07-07 00:09:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 zsa513 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿郑州大学085600求调剂 +17 吃的不少 2026-04-05 20/1000 2026-04-06 00:32 by T可可西里T
[考研] 304求调剂 +7 c297914 2026-04-05 8/400 2026-04-05 22:13 by hemengdong
[考研] 22408 总分320，一篇论文二作，两个国三，求调剂 +3 Leomulufu 2026-04-04 5/250 2026-04-05 19:04 by chongya
[考研] 求调剂，一志愿郑州大学材料与化工专硕，英二数二342分，求老师收留 +18 v12abo 2026-04-02 20/1000 2026-04-05 11:37 by a8144223
[考研] 271分求调剂学校 +12 zph158488！ 2026-04-02 13/650 2026-04-05 10:13 by lqwchd
[考研] 材料与化工363求推荐 +7 zh096 2026-04-04 7/350 2026-04-05 09:11 by 陌秋26
[考研] 材料调剂 +11 一样YWY 2026-04-02 13/650 2026-04-04 23:10 by 无际的草原
[考研] 材料调剂 +15 一样YWY 2026-04-01 15/750 2026-04-04 22:23 by hemengdong
[考研] 341求调剂 +3 洛多罗 2026-04-02 4/200 2026-04-04 21:36 by 智能智慧
[考研] 085701求调剂 +7 龚禹铭 2026-04-04 8/400 2026-04-04 13:49 by 小小树2024
[考研] 282求调剂 +20 ycy1201 2026-04-01 22/1100 2026-04-04 00:42 by userper
[考研] 机械专硕297 +3 Afksy 2026-04-03 3/150 2026-04-03 14:24 by 1753564080
[考研] 366求调剂 +7 sbdnd 2026-04-03 7/350 2026-04-03 12:40 by cymywx
[考研] 085801 总分275 本科新能源 求调剂 +19 bradoner 2026-04-01 23/1150 2026-04-03 10:07 by linyelide
[考研] 一志愿武汉理工0856，初试334 +3 26考研材料 2026-04-02 3/150 2026-04-02 21:22 by dongzh2009
[考研] 一志愿厦门大学化学工程（专硕）-数二英二406分-求调剂 +5 厦大化工 2026-04-01 5/250 2026-04-02 10:03 by jp9609
[考研] 食品学硕362求调剂 +3 xuanxianxian 2026-04-01 3/150 2026-04-01 21:05 by 啊李999
[考研] 349求调剂 +6 吃的不少 2026-04-01 6/300 2026-04-01 17:55 by JYD2011
[考研] 262求调剂 +9 励志一定发文章 2026-03-31 10/500 2026-04-01 12:22 by sunshine0013
[考研] 物理学调剂 +4 小羊36 2026-03-30 4/200 2026-03-31 16:16 by lishahe
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭