应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 请问两个关于denature PAGE的问题~
51/1返回列表
查看: 1951  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

zsa513

新虫 (初入文坛)

[交流] 请问两个关于denature PAGE的问题~ 已有2人参与

我用denature PAGE(urea)跑DNA, 感觉迁移率非常的慢，这是正常的么？我平时跑蛋白顶多1个小时，这样感觉至少要2，3个小时，我跑的DNA片段很小20-70bp，用的12%的胶，请问大牛大概要跑多长时间啊？

还有一个问题，就是我跑觉的时候，current的电压会随着时间变动，我已经选了电泳constant了。以前从来不会变的。这是胶或者buffer有问题么？还是电泳仪mode的问题？还是说跑这种电泳就是会这样？

求大牛解释！多谢！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-07-03 11:41:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zsa513

新虫 (初入文坛)
dhd997: 可以引用回复 2011-07-04 18:07:16
非常感谢，前一个问题，请问也能帮我解释下么？
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2011-07-04 11:32:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

zhoujunnju

至尊木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
1949stone(金币+1): 鼓励 2011-07-03 18:12:15
恒定电压试一试，胶可以10%，buffer可以用新制备的
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2011-07-03 15:54:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zsa513

新虫 (初入文坛)
我电压已经选的恒定的了，但是跑起来，就会变

我以前跑胶也是用的12%的，可是跑蛋白的时候速度没问题啊，改泡DNA的时候配方是变了，可是胶的浓度没变啊

继续求解释~
赞一下 回复此楼
3楼2011-07-04 01:51:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西瓜

荣誉版主 (知名作家)
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
dhd997(金币+3): 2011-07-04 18:06:56
引用回帖:
Originally posted by zsa513 at 2011-07-04 01:51:15:
我电压已经选的恒定的了，但是跑起来，就会变

我以前跑胶也是用的12%的，可是跑蛋白的时候速度没问题啊，改泡DNA的时候配方是变了，可是胶的浓度没变啊

继续求解释~

缓冲液的问题或者是电泳仪设定的问题。

电泳液的体系是随着电泳的进行是不断变化的，可以设定恒压或者恒流，但是恒压时，电流是随着电泳进行不断变大的，反之亦然。
电泳仪有保护功能，设定恒压时，设定的电流为允许的最大电流，当电流超过这个最大值时会自动切换成恒流，此时随着电泳进行变化的就是电压了。

你看看一般跑DNA时的电压是多少，可能是跑蛋白的参数不适合于DNA，可以把最大电流值设置大一些。如果参数设置没错，那就是缓冲液不行，重新配缓冲液。
赞一下(2人) 回复此楼
4楼2011-07-04 09:46:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭