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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 非变性PAGE胶 跑DNA 没条带
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蓝Bud

新虫 (初入文坛)

[求助] 非变性PAGE胶 跑DNA 没条带 已有1人参与

我跑的DNA，非变性胶，以前一直有条带，不知道最近几次怎么了，一直跑不出条带，重要的是MAKER也没
非变性PAGE胶  跑DNA   没条带
DSC_0991_副本.jpg
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1楼 2013-12-09 17:06:43
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lihe131

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励交流！ 2013-12-31 16:09:24
是EB染的吗？胶上棕色的不是被染色的DNA吗？检查一下buffer的pH和胶浓度吧。祝好运！
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2楼2013-12-10 22:13:02
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蓝Bud

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lihe131 at 2013-12-10 22:13:02
是EB染的吗？胶上棕色的不是被染色的DNA吗？检查一下buffer的pH和胶浓度吧。祝好运！

是硝酸银，昨天发现居然是试剂的问题，吐血，谢谢你
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3楼2013-12-11 09:40:30
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qapollo

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2013-12-12 15:30:17
你的胶是多高浓度的？凝胶是不是太快了？TEMED和APS加的是不是有点多？你的胶有点脆，PCR产物也都停留在胶孔附近没有跑下来，你看到的红色都是引物。重新制胶，适当减少一些TEMED和APS看看。
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4楼2013-12-12 15:29:22
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蓝Bud

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by qapollo at 2013-12-12 15:29:22
你的胶是多高浓度的？凝胶是不是太快了？TEMED和APS加的是不是有点多？你的胶有点脆，PCR产物也都停留在胶孔附近没有跑下来，你看到的红色都是引物。重新制胶，适当减少一些TEMED和APS看看。

凝的太快会产生什么问题吗？我最近插梳子的地方总是凝的特别慢，有时候2小时都不行
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5楼2013-12-25 17:59:14
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qapollo

金虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 蓝Bud at 2013-12-25 17:59:14
凝的太快会产生什么问题吗？我最近插梳子的地方总是凝的特别慢，有时候2小时都不行...

凝胶越快，胶体分子越不均匀。电泳时，温度一高条带就会向下弯。你的凝胶时间太长了，是不是TEMED失效了？
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6楼2013-12-25 22:26:55
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夕夕如玦

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 蓝Bud at 2013-12-11 09:40:30
是硝酸银，昨天发现居然是试剂的问题，吐血，谢谢你...

我也有同样邪恶情况，你后来是什么原因啊？
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7楼2015-04-29 22:29:25
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