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machao8405

木虫 (正式写手)


[交流] DNA loading buffer和RNA loading buffer有啥区别?

如题,RNA loading buffer除了RNase-Free,还有什么特别的地方?
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userhung

禁虫 (文学泰斗)


★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
amisking: 回帖置顶 2013-11-17 19:16:03
amisking: 金币+3, 鼓励发帖交流! 2013-11-17 19:16:11
10*Loading buffer和6*Loading buffer的区别

6XLoading Buffer是琼脂糖/聚丙烯酰胺凝胶电泳用的6倍浓度的核酸样品用Loading Buffer。向电泳样品溶液中加入1/6量即可进行凝胶电泳。10XLoading Buffer是用于琼脂糖凝胶电泳的10倍浓度的核酸样品用Loading Buffer。制品中含有SDS,可即刻停止各种酶促反应。向酶促反应液中加入1/10量的本制品,即可停止反应,此溶液可直接用于琼脂糖凝胶电泳。
此外,10 X loading buffer 中仅有色素溴酚蓝(Bromophenol Blue)一种染料(浓度0.05%);6 X loading buffer 中含色素溴酚蓝(Bromophenol Blue)、二甲苯腈蓝FF(Xylene Cyanol FF)两种染料(浓度都是0.05%),溴酚蓝在琼脂糖凝胶(0.5% ~ 1.4%)中约与300 bp的双链线状DNA的迁移速度相同,而二甲苯腈蓝FF则与4 kbp的双链线状DNA的迁移速度相等

6×Loading buffer:
30mM EDTA
36%(v/v) Glycerol
0.05%(w/v) Xylene Cyanol FF
0.05%(w/v) Bromophenol Blue

主要用于DNA电泳
10×Loading buffer:
30mM EDTA
50%(v/v) Glycerol
0.25%(w/v) Xylene Cyanol FF
0.25%(w/v) Bromophenol Blue
主要用于RNA电泳
3楼2013-11-17 16:19:09
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普通回帖

soarrow

铁杆木虫 (正式写手)


★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-11-17 20:54:12
好像还有甲酰胺还是什么的,目的是为了让RNA保持线性,否则RNA容易形成二级结构,迁移率就不准了

2楼2013-11-17 16:13:59
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userhung

禁虫 (文学泰斗)


★ ★
machao8405(gyesang代发): 金币+2, 鼓励交流! 2013-11-17 22:29:27
4楼2013-11-17 16:19:57
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164450157

银虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
amisking: 欢迎学术交流,不鼓励无厘头的回帖哦 2013-11-17 19:16:37
祝楼主好运连连,心想事成!
5楼2013-11-17 16:51:22
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zh10246

铁杆木虫 (文坛精英)


我都用一样的
6楼2013-11-17 22:59:05
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李佳洋

铜虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
RNA LOADING BUFFER 主要用于变性胶,DNA LOADING buffer 一个是颜色指示的作用,一个是沉淀样品防止飘样的作用
7楼2013-11-19 21:59:01
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malstose

金虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by userhung at 2013-11-17 16:19:09
10*Loading buffer和6*Loading buffer的区别

6XLoading Buffer是琼脂糖/聚丙烯酰胺凝胶电泳用的6倍浓度的核酸样品用Loading Buffer。向电泳样品溶液中加入1/6量即可进行凝胶电泳。10XLoading Buffer是用于琼脂糖 ...

小问下,您在上面说的是10 X loading buffer 中仅有色素溴酚蓝(Bromophenol Blue)一种染料,并且含有SDS,但下面的配方中并未显示啊,依然是两种染料且没有SDS啊?
8楼2015-04-02 05:56:43
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lxzk

木虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
2楼: Originally posted by soarrow at 2013-11-17 16:13:59
好像还有甲酰胺还是什么的,目的是为了让RNA保持线性,否则RNA容易形成二级结构,迁移率就不准了


含有甲酰胺的是变性电泳用的,DNA和RNA都要有

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
9楼2015-04-02 09:15:23
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下一片海

新虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by userhung at 2013-11-17 16:19:09
10*Loading buffer和6*Loading buffer的区别

6XLoading Buffer是琼脂糖/聚丙烯酰胺凝胶电泳用的6倍浓度的核酸样品用Loading Buffer。向电泳样品溶液中加入1/6量即可进行凝胶电泳。10XLoading Buffer是用于琼脂糖 ...

二甲苯青和二甲苯腈蓝是一个东西吗?

发自小木虫Android客户端
10楼2017-05-09 13:19:24
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