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xulu2008金虫 (正式写手)
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[求助]
若回收胶，跑电泳应加多少样品
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| 我想通过跑电泳得到目的基因的条带，再回收胶，那每孔应加多少pcr产物呢（大孔）？；loadingbuffer加多少 |
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 【分子生物】EPI帖 |
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zhlf1989513
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【答案】应助回帖
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1、胶的浓度主要看你的目的基因的大小，一般1%到2%，大的话浓度就低点，小的话浓度就高点。 2、至于loading buffer的问题，正如楼上所说的，看你的loading buffer是几X的，是几X的loading buffer 最终loading buffer的量就占几分之几。比如6X的，当你上10ul的样时，loading buffer 就上2ul。 3、一般使用6X的loading buffer。 4、要胶回收的话，最好就多上点样喽，一般我是上50ul的样。 祝楼主实验顺利~~~ |
11楼2012-10-28 16:46:59
hj890509
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2楼2012-10-26 12:00:10
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3楼2012-10-26 12:00:13
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4楼2012-10-26 12:16:33
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5楼2012-10-26 12:21:20
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【答案】应助回帖
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小丹木木: 金币+3, 鼓励积极交流经验 2012-10-28 17:53:28
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个人意见，仅供参考！ 1.上样量的多少视乎你PCR产物的浓度，和点样孔的承载能力； 2.loading buffer的使用量要看两点：首先，你用的loading buffer是几X的，正确的使用方法应该是loading buffer的终浓度为1X的； 3.建议使用6X的buffer，本人之前用10X的出现过一条大约1500bp的条带，但胶回收什么都没有，问过他们公司的技术部门才知道，那个条带是buffer里面的一些东西和PCR体系中的某些东西发生反应产生的假条带。 |
10楼2012-10-28 15:54:38
