应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 若回收胶，跑电泳应加多少样品
161/2返回列表12下一页
查看: 3614  |  回复: 15
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看

xulu2008

金虫 (正式写手)

[求助] 若回收胶，跑电泳应加多少样品

我想通过跑电泳得到目的基因的条带，再回收胶，那每孔应加多少pcr产物呢（大孔）？；loadingbuffer加多少
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

【分子生物】EPI帖

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-10-26 11:51:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖置顶 ( 共有1个 )

zhlf1989513

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, MolEPI+1, 鼓励应助 2012-10-28 17:54:06
1、胶的浓度主要看你的目的基因的大小，一般1%到2%，大的话浓度就低点，小的话浓度就高点。
2、至于loading buffer的问题，正如楼上所说的，看你的loading buffer是几X的，是几X的loading buffer 最终loading buffer的量就占几分之几。比如6X的，当你上10ul的样时，loading buffer 就上2ul。
3、一般使用6X的loading buffer。
4、要胶回收的话，最好就多上点样喽，一般我是上50ul的样。
祝楼主实验顺利~~~
赞一下 回复此楼
keepon
11楼2012-10-28 16:46:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

hj890509

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-10-28 17:52:44
孔不同加样量也不同，大孔有30ul和50ul的，我们做的时候50ul样品中加了10ulbuffer
点样量为30ul
赞一下 回复此楼
2楼2012-10-26 12:00:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

杰-米尼

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我也是新手。现在每次回收我都是每个孔加80ulPCR产物，loadingbuffer相应多加一些就是了
赞一下 回复此楼
做科研还是需要好的逻辑能力的 加油
3楼2012-10-26 12:00:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

静安jingan

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
就是30ul左右，你的样品可以全加的啊
赞一下 回复此楼
让复杂的事情变简单，简单的事情更简单
4楼2012-10-26 12:16:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xulu2008

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by hj890509 at 2012-10-26 12:00:10
孔不同加样量也不同，大孔有30ul和50ul的，我们做的时候50ul样品中加了10ulbuffer
点样量为30ul

那一般胶配多厚呢
赞一下 回复此楼
5楼2012-10-26 12:21:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Marado

金虫 (正式写手)

Dreamer

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
5楼: Originally posted by xulu2008 at 2012-10-26 12:21:20
那一般胶配多厚呢...

我一般配30ul，0.8%的胶，中等孔径大小梳子，8个孔，每个孔50ul样品.
赞一下 回复此楼
Look,ifyouhadoneshot,oroneopportunity,toseizeeverythingyoueverwanted,inonemoment.Wouldyoucaptureit,orjustletitslip?
6楼2012-10-26 14:40:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

review

银虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
50ul  loading加 5ul    全都点进去的（大孔）
赞一下 回复此楼
交流
7楼2012-10-26 16:03:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

木小默

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我都是尽可能的多加，因为要回收，样加的多的话回收的产物浓度比较高，有利于后续实验！
赞一下 回复此楼
8楼2012-10-28 15:07:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

木小默

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我都是尽可能的多加，因为要回收，样加的多的话回收的产物浓度比较高，有利于后续实验！
赞一下 回复此楼
9楼2012-10-28 15:07:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huangguoqing

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+3, 鼓励积极交流经验 2012-10-28 17:53:28
个人意见，仅供参考！
1.上样量的多少视乎你PCR产物的浓度，和点样孔的承载能力；
2.loading buffer的使用量要看两点：首先，你用的loading buffer是几X的，正确的使用方法应该是loading buffer的终浓度为1X的；
3.建议使用6X的buffer，本人之前用10X的出现过一条大约1500bp的条带，但胶回收什么都没有，问过他们公司的技术部门才知道，那个条带是buffer里面的一些东西和PCR体系中的某些东西发生反应产生的假条带。
赞一下 回复此楼
10楼2012-10-28 15:54:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 xulu2008 的主题更新
161/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的？ +12 爱看书的可乐 2026-08-26 14/700 2026-08-26 14:50 by coolysnow
[基金申请] 出来了 +9 trojank 2026-08-26 9/450 2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
[基金申请] 哪位高人中了，把查询到的截图贴出来让我看看，让我长长见识 +4 yuleib84 2026-08-26 5/250 2026-08-26 13:40 by yuleib84
[基金申请] 系统查不到 +9 董八千 2026-08-26 9/450 2026-08-26 12:30 by yanmofang
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 国际合作可查了，中了面上 +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +6 process2012 2026-08-23 8/400 2026-08-26 11:03 by zjlp
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 今天务委会开完了，明天出结果吗 +19 angus9576 2026-08-25 23/1150 2026-08-26 10:03 by zp519
[基金申请] 国合现在查不到了吗？ +10 chengyan1220 2026-08-24 20/1000 2026-08-26 08:57 by peasantsprig
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +21 羊腰板 2026-08-21 24/1200 2026-08-26 07:20 by finnigan
[基金申请] 有没有大神帮我看看基金代码 28+4 1234567wang 2026-08-24 10/500 2026-08-25 19:15 by lfy8008
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑，不妨来听听这首《基金之外》 +8 scalable 2026-08-24 8/400 2026-08-25 12:52 by jnhyjjm
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +9 图啦图啦 2026-08-24 10/500 2026-08-25 11:59 by 南海小哥
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +13 kulium 2026-08-21 16/800 2026-08-24 16:27 by superceng
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办？ +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧？ +4 哈哈蛤？ 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭