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machao8405

木虫 (正式写手)

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[交流] DNA loading buffer和RNA loading buffer有啥区别？

如题，RNA loading buffer除了RNase-Free，还有什么特别的地方？

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1楼 2013-11-17 15:25:08

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malstose

金虫 (正式写手)

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引用回帖:

3楼: Originally posted by userhung at 2013-11-17 16:19:09
10*Loading buffer和6*Loading buffer的区别

6XLoading Buffer是琼脂糖/聚丙烯酰胺凝胶电泳用的6倍浓度的核酸样品用Loading Buffer。向电泳样品溶液中加入1/6量即可进行凝胶电泳。10XLoading Buffer是用于琼脂糖 ...

小问下，您在上面说的是10 X loading buffer 中仅有色素溴酚蓝（Bromophenol Blue)一种染料，并且含有SDS，但下面的配方中并未显示啊，依然是两种染料且没有SDS啊？

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8楼2015-04-02 05:56:43

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soarrow

铁杆木虫 (正式写手)

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★ ★ ★
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gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-11-17 20:54:12

好像还有甲酰胺还是什么的，目的是为了让RNA保持线性，否则RNA容易形成二级结构，迁移率就不准了

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2楼2013-11-17 16:13:59

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userhung

禁虫 (文学泰斗)

★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
amisking: 回帖置顶 2013-11-17 19:16:03
amisking: 金币+3, 鼓励发帖交流！ 2013-11-17 19:16:11

10*Loading buffer和6*Loading buffer的区别

6XLoading Buffer是琼脂糖/聚丙烯酰胺凝胶电泳用的6倍浓度的核酸样品用Loading Buffer。向电泳样品溶液中加入1/6量即可进行凝胶电泳。10XLoading Buffer是用于琼脂糖凝胶电泳的10倍浓度的核酸样品用Loading Buffer。制品中含有SDS，可即刻停止各种酶促反应。向酶促反应液中加入1/10量的本制品，即可停止反应，此溶液可直接用于琼脂糖凝胶电泳。
此外，10 X loading buffer 中仅有色素溴酚蓝（Bromophenol Blue)一种染料（浓度0.05%）；6 X loading buffer 中含色素溴酚蓝（Bromophenol Blue)、二甲苯腈蓝FF（Xylene Cyanol FF)两种染料（浓度都是0.05%），溴酚蓝在琼脂糖凝胶（0.5% ~ 1.4%）中约与300 bp的双链线状DNA的迁移速度相同，而二甲苯腈蓝FF则与4 kbp的双链线状DNA的迁移速度相等

6×Loading buffer:
30mM EDTA
36%(v/v) Glycerol
0.05%(w/v) Xylene Cyanol FF
0.05%(w/v) Bromophenol Blue

主要用于DNA电泳
10×Loading buffer:
30mM EDTA
50%(v/v) Glycerol
0.25%(w/v) Xylene Cyanol FF
0.25%(w/v) Bromophenol Blue
主要用于RNA电泳

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3楼2013-11-17 16:19:09

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