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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 动植物 » 实验技术 » 请大家帮我看下RNA电泳图
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a71840584

金虫 (正式写手)

[求助] 请大家帮我看下RNA电泳图 已有2人参与

大家帮我看看这次提的RNA有无降解。。我怎么感觉28S和18S亮度一样呢。。还有18S那我感觉怎么好像有两条带没分开似得（第9条带那里最明显，18S的中间好像有条裂缝）

请大家帮我看下RNA电泳图
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再牛逼的肖邦也弹不出哥的忧伤。。。
1楼 2015-01-20 19:58:03
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yangyang1991

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
q317476148: 金币+2, 鼓励积极参与交流 2015-01-21 09:20:10
这是降解的原因，或许是上样量太大了。。。你可以稀释下试试～最好的应该是上面一条带亮度是下面的两倍。

[ 发自小木虫客户端 ]
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2楼2015-01-20 22:56:51
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
是从叶子里提的吗？
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3楼2015-01-21 22:02:56
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a71840584

金虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by cicelyzh at 2015-01-21 22:02:56
是从叶子里提的吗？

是呀。。蚕豆叶片。。你看看这是什么情况啊。。帮我分析分析。。谢谢

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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再牛逼的肖邦也弹不出哥的忧伤。。。
4楼2015-01-21 23:35:30
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chenguestc

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
怎么感觉28S和18S亮度一样呢。。

个人感觉你的曝光度太强了，或者样品加样量太多了

还有18S那我感觉怎么好像有两条带没分开似得

是两条带，这个没有问题，只是曝光度太强使得看起来像一条带。

RNA质量还可以，有部分降解，如果加样量少点，曝光度低点，或许看起来不像是降解厉害（或许降解不严重）
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5楼2015-01-22 17:57:24
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
引用回帖:
4楼: Originally posted by a71840584 at 2015-01-21 23:35:30
是呀。。蚕豆叶片。。你看看这是什么情况啊。。帮我分析分析。。谢谢
...

很正常。因为叶片里有大量叶绿体，提出来RNA的还有叶绿体rRNA，是原核的，18S和叶绿体中的16S的分不很开。
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6楼2015-01-23 00:04:18
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a71840584

金虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by chenguestc at 2015-01-22 17:57:24
怎么感觉28S和18S亮度一样呢。。

个人感觉你的曝光度太强了，或者样品加样量太多了

还有18S那我感觉怎么好像有两条带没分开似得

是两条带，这个没有问题，只是曝光度太强使得看起来像一条带。

RNA质量还 ...

谢谢，你看我提到这种程度能进行反转录嘛？我下一步要做RTPCR看某种特定酶基因的表达量。
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再牛逼的肖邦也弹不出哥的忧伤。。。
7楼2015-01-23 10:31:07
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chenguestc

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by a71840584 at 2015-01-23 10:31:07
谢谢，你看我提到这种程度能进行反转录嘛？我下一步要做RTPCR看某种特定酶基因的表达量。...

如果表达量不要求非常精确的话，可以做，反转录前测好浓度。
当然如果要是反转录后做定量PCR的话，还是用降解量相对较少的为好。
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8楼2015-01-23 13:47:13
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