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多重PCR的引物设计 已有2人参与
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比如，我要一次性检测5种细菌。 要怎么设计引物呢？ |
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5楼2015-04-13 09:31:34
2楼2015-01-12 20:46:44
3楼2015-01-12 23:32:08
18761615793
木虫 (正式写手)
小虫
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【答案】应助回帖
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jingmi(西门吹雪170代发): 金币+3, 鼓励回帖交流 2015-01-14 20:15:34
jingmi: 金币+7, ★★★★★最佳答案 2015-02-02 16:23:48
jingmi(西门吹雪170代发): 金币+3, 鼓励回帖交流 2015-01-14 20:15:34
jingmi: 金币+7, ★★★★★最佳答案 2015-02-02 16:23:48
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设计五种引物，进行多重PCR，如果一种一种检测的话，需要进行五次PCR反应，太耗时耗力了。所以一次性设计五对引物，进行多重PCR的话，可以将你要检测的细菌一次全部检测出来。 不过五对引物的PCR，对引物的要求较高，需要专门的软件设计、检测。同时对反应的特异性也要求很高，尤其是酶，不要使用普通的Taq酶，使用普通Taq可定不会得到好的结果。建议使用特异性好的热启动Taq酶，如果模板不超过10kb的话，也不建议使用高保真酶。个人推荐 Relia热启动Taq酶，扩增人类基因组的6个区域，特异性很好。 http://www.detaibio.com/relia-hotstart-polymerase.html 希望对你有所帮助。  |
4楼2015-01-13 11:17:34
