24小时热门版块排行榜    

查看: 2508  |  回复: 4

jingmi

新虫 (正式写手)

[求助] 多重PCR的引物设计 已有2人参与

比如,我要一次性检测5种细菌。
要怎么设计引物呢?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

IPCAAS

新虫 (小有名气)

同求教,我要一次性检测5种植物病原真菌
2楼2015-01-12 20:46:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

781055707

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
设计五种引物,加一起,用不同的探针就可以了。不闲麻烦的话,五种引物交错比对下。我最多用三重,五重的假阳性太大。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
采菊东篱下,悠然见南山。
3楼2015-01-12 23:32:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
jingmi(西门吹雪170代发): 金币+3, 鼓励回帖交流 2015-01-14 20:15:34
jingmi: 金币+7, ★★★★★最佳答案 2015-02-02 16:23:48
设计五种引物,进行多重PCR,如果一种一种检测的话,需要进行五次PCR反应,太耗时耗力了。所以一次性设计五对引物,进行多重PCR的话,可以将你要检测的细菌一次全部检测出来。
不过五对引物的PCR,对引物的要求较高,需要专门的软件设计、检测。同时对反应的特异性也要求很高,尤其是酶,不要使用普通的Taq酶,使用普通Taq可定不会得到好的结果。建议使用特异性好的热启动Taq酶,如果模板不超过10kb的话,也不建议使用高保真酶。个人推荐 Relia热启动Taq酶,扩增人类基因组的6个区域,特异性很好。
http://www.detaibio.com/relia-hotstart-polymerase.html
希望对你有所帮助。
todayisdifficult,tomorrowismoredifficult,butthedayaftertomorrowisbeautiful
4楼2015-01-13 11:17:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

那是我的-

铜虫 (小有名气)

请问一下楼主有没有解决,最近也需要呢。
5楼2015-04-13 09:31:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 jingmi 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +15 archvillain 2026-08-15 27/1350 2026-08-21 11:32 by tim76
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +15 kkkl_v 2026-08-19 16/800 2026-08-21 11:22 by 365372687
[基金申请] 科研孤儿太难了 +15 我4大白菜 2026-08-20 16/800 2026-08-21 11:07 by yming1319
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 让我中一个面上吧! +10 大萍1987 2026-08-20 12/600 2026-08-21 09:31 by 020100099
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 时间戳今天,20号变了 +4 archvillain 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:10 by gatelove
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +22 yaoyewhu2008 2026-08-20 24/1200 2026-08-21 07:44 by DanielDDDD
[基金申请] 估计是周四 +3 archvillain 2026-08-18 3/150 2026-08-21 01:48 by jnhyjjm
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +10 zju2000 2026-08-16 11/550 2026-08-20 20:02 by cl479861084
[基金申请] 时间戳变了,能看出什么问题? +18 基诺咪客 2026-08-17 23/1150 2026-08-20 17:19 by Godzela
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[教师之家] 为什么余额宝的年化利率越来越低?主要原因有哪些? +5 瞬息宇宙 2026-08-15 5/250 2026-08-19 20:23 by super2002521
[基金申请] 2027广东省杰青 +4 奶牛小黑 2026-08-15 10/500 2026-08-19 11:02 by wanfengnew
[基金申请] 什么时候开奖? +6 CrisMessi 2026-08-18 6/300 2026-08-19 08:06 by Equinoxhua
[基金申请] 明天放榜? +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +4 且听虎啸 2026-08-17 5/250 2026-08-18 00:49 by 蔡棒棒菂
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +6 angus9576 2026-08-17 11/550 2026-08-17 23:57 by angus9576
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
信息提示
请填处理意见