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1291115202

新虫 (初入文坛)

[求助] 植物总RNA提取问题 已有2人参与

用试剂盒提植物的总RNA,跑出来的条带,不是本应该28s是18s条带亮度的2倍吗?我的反而是18s的条带更亮一些。这是因为RNA降解了吗?这样的RNA做反转录还能做出来吗?

植物总RNA提取问题
Administrator 2015-01-08 10 时 40 分.jpg
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晞朔

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
要求不高的话,反转录没问题。可以做一下试一试。
2楼2015-01-12 08:56:14
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1291115202

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 晞朔 at 2015-01-12 08:56:14
要求不高的话,反转录没问题。可以做一下试一试。

这样的RNA做反转录没问题吗?我做了,得到的cDNA做了一下Actin的PCR,结果电泳没出条带。反转录试剂和PCR的相关试剂都是实验室一直在用的,不明白哪里出问题了?最近做了好多次,一直是这个情况...
3楼2015-01-12 10:43:55
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晞朔

金虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 1291115202 at 2015-01-12 10:43:55
这样的RNA做反转录没问题吗?我做了,得到的cDNA做了一下Actin的PCR,结果电泳没出条带。反转录试剂和PCR的相关试剂都是实验室一直在用的,不明白哪里出问题了?最近做了好多次,一直是这个情况......

测浓度和质量了吗?260/280值,260/230值,这些指标也很重要。一般用nanodrop2000可以直接测出来。
4楼2015-01-12 10:54:37
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哼哈啊啊啊a

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 1291115202 at 2015-01-12 10:43:55
这样的RNA做反转录没问题吗?我做了,得到的cDNA做了一下Actin的PCR,结果电泳没出条带。反转录试剂和PCR的相关试剂都是实验室一直在用的,不明白哪里出问题了?最近做了好多次,一直是这个情况......

你有把体系相应增大么?

[ 发自小木虫客户端 ]
5楼2015-01-12 10:55:17
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1291115202

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 哼哈啊啊啊a at 2015-01-12 10:55:17
你有把体系相应增大么?
...

恩,增大了。没犯这个错误
6楼2015-01-12 12:02:37
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1291115202

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 晞朔 at 2015-01-12 10:54:37
测浓度和质量了吗?260/280值,260/230值,这些指标也很重要。一般用nanodrop2000可以直接测出来。...

几次提的RNA浓度都在500-800,低的时候两三百,268/280的值都差不多在2
7楼2015-01-12 12:05:56
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晞朔

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

rna质量没问题,可以再优化下逆转录protocal

[ 发自小木虫客户端 ]
8楼2015-01-12 12:23:05
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1291115202

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 晞朔 at 2015-01-12 12:23:05
rna质量没问题,可以再优化下逆转录protocal

好吧~谢谢
9楼2015-01-12 14:47:25
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键盘上的脚丫

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
8楼: Originally posted by 晞朔 at 2015-01-12 12:23:05
rna质量没问题,可以再优化下逆转录protocal

你厉害哟,每张帖子都看到你。。。。这是放假了,你要帮助大家的节奏吗?
10楼2015-01-13 15:21:04
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