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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 植物总RNA提取问题
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1291115202

新虫 (初入文坛)

[求助] 植物总RNA提取问题 已有2人参与

用试剂盒提植物的总RNA，跑出来的条带，不是本应该28s是18s条带亮度的2倍吗？我的反而是18s的条带更亮一些。这是因为RNA降解了吗？这样的RNA做反转录还能做出来吗？

植物总RNA提取问题
Administrator 2015-01-08 10 时 40 分.jpg
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1楼 2015-01-09 12:16:54
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晞朔

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
要求不高的话，反转录没问题。可以做一下试一试。
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2楼2015-01-12 08:56:14
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1291115202

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 晞朔 at 2015-01-12 08:56:14
要求不高的话，反转录没问题。可以做一下试一试。

这样的RNA做反转录没问题吗？我做了，得到的cDNA做了一下Actin的PCR，结果电泳没出条带。反转录试剂和PCR的相关试剂都是实验室一直在用的，不明白哪里出问题了？最近做了好多次，一直是这个情况...
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3楼2015-01-12 10:43:55
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晞朔

金虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 1291115202 at 2015-01-12 10:43:55
这样的RNA做反转录没问题吗？我做了，得到的cDNA做了一下Actin的PCR，结果电泳没出条带。反转录试剂和PCR的相关试剂都是实验室一直在用的，不明白哪里出问题了？最近做了好多次，一直是这个情况......

测浓度和质量了吗？260/280值，260/230值，这些指标也很重要。一般用nanodrop2000可以直接测出来。
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4楼2015-01-12 10:54:37
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哼哈啊啊啊a

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 1291115202 at 2015-01-12 10:43:55
这样的RNA做反转录没问题吗？我做了，得到的cDNA做了一下Actin的PCR，结果电泳没出条带。反转录试剂和PCR的相关试剂都是实验室一直在用的，不明白哪里出问题了？最近做了好多次，一直是这个情况......

你有把体系相应增大么？

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5楼2015-01-12 10:55:17
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1291115202

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 哼哈啊啊啊a at 2015-01-12 10:55:17
你有把体系相应增大么？
...

恩，增大了。没犯这个错误
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6楼2015-01-12 12:02:37
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1291115202

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 晞朔 at 2015-01-12 10:54:37
测浓度和质量了吗？260/280值，260/230值，这些指标也很重要。一般用nanodrop2000可以直接测出来。...

几次提的RNA浓度都在500-800，低的时候两三百，268/280的值都差不多在2
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7楼2015-01-12 12:05:56
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晞朔

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

rna质量没问题，可以再优化下逆转录protocal

[ 发自小木虫客户端 ]
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8楼2015-01-12 12:23:05
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1291115202

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 晞朔 at 2015-01-12 12:23:05
rna质量没问题，可以再优化下逆转录protocal

好吧~谢谢
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9楼2015-01-12 14:47:25
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键盘上的脚丫

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
8楼: Originally posted by 晞朔 at 2015-01-12 12:23:05
rna质量没问题，可以再优化下逆转录protocal

你厉害哟，每张帖子都看到你。。。。这是放假了，你要帮助大家的节奏吗？
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10楼2015-01-13 15:21:04
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