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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » DNA　ＯＤ值２６０／２３０＜１
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anona

铜虫 (初入文坛)

[求助] DNA　ＯＤ值２６０／２３０＜１ 已有2人参与

师兄四个月之前提取的肠道微生物DNA，保存在负２０度，浓度在50~300，ＯＤ260/280在２～２.２,，ＯＤ２６０／２３０在２～３之间，现在我准备做荧光定量ＰＣＲ，检测ＤＮＡ２６０／２３０都＜１，２６０／２８０在２.１～２.３之间，求助，实验还能做吗？有什么补救的方法吗？小白求指教。
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1楼 2015-01-09 08:25:49
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781055707

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2015-01-09 19:37:32
没事，接着做。２６０／２８０在２.１～２.３之间这个正常就行。
A260/A280和A260/A230  是核酸纯度的指示值。纯度好的DNA或RNA，在pH7-8.5 下A260 / A280的比值应该在2.0 或2.5。 纯净的样品比值大于1.8（DNA）或者2.0（RNA）。如果比值低于1.8 或者2.0，表示存在蛋白质或者酚类物质的影响。A230表示样品中存在一些污染物，如碳水化合物、盐（胍盐）等，较纯净的核酸A260/A230的比值大于2.0 。  当 0.5％BSA蛋白质污染时，蛋白污染会导致260和280的数值都下降，其净结果是260/280比值下降，但260/280的比值变化并不显著，正如分子克隆3所说。但蛋白残留会导致230的数值显著上升，显著影响260/230的比值。也就是说，如果RNA样品的260/280＝1.7，260 /230＝0.5，那么就应该考虑污染原因不是胍盐残留，而是蛋白残留
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采菊东篱下，悠然见南山。
2楼2015-01-09 09:19:57
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晞朔

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

仅仅做ｑＲＴ可以试试，如果做高通量测序，那就最好重提了。
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3楼2015-01-12 19:58:46
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anona

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 781055707 at 2015-01-09 09:19:57
没事，接着做。２６０／２８０在２.１～２.３之间这个正常就行。
A260/A280和A260/A230  是核酸纯度的指示值。纯度好的DNA或RNA，在pH7-8.5 下A260 / A280的比值应该在2.0 或2.5。 纯净的样品比值大于1.8（DNA）或 ...

今天试了一下，还可以，谢谢，
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4楼2015-01-12 22:11:27
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anona

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 晞朔 at 2015-01-12 19:58:46
仅仅做ｑＲＴ可以试试，如果做高通量测序，那就最好重提了。

谢谢
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5楼2015-01-12 22:11:35
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