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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 存档旧帖 » 质粒DNA扩增后OD260/OD280总是大于2
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来丹玉

新虫 (初入文坛)

[交流] 质粒DNA扩增后OD260/OD280总是大于2 已有8人参与

我用碱裂解法抽提的质粒DNA，OD260/OD280总是大于2,网上查的说大于2是RNA污染了，可是我加了RNaseA的啊，可能是哪一步的问题？？
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1楼 2013-12-06 10:36:34
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wlsino

金虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-06-04 08:25:40
不要相信这个值，太多因素会影响了，几乎没有任何实用意义
看nanodrop的吸收曲线形状就可以了

确定RNA污染最好的办法就是跑胶。
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2楼2013-12-06 13:13:30
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huahu3600

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
稍微有点RNA没关系，加了RNaseA，也得给它起作用的条件呀
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3楼2013-12-06 15:24:49
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逍遥e宝

铁杆木虫 (正式写手)

我爱黄赌毒
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
抽质粒的时候，RNASEA 要37℃水浴1h的……
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无数老鼠的生命祭奠了我被偷走的那五年---------------forever宝
4楼2013-12-06 16:30:56
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soarrow

铁杆木虫 (正式写手)

酱油歪楼党
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
换个好用点的试剂盒吧，见效快
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5楼2013-12-06 16:34:25
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梧桐柒夕

主管区长 (文坛精英)

优秀区长优秀区长优秀区长优秀区长优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你加的量是多少啊？
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轻描淡写，浓墨重彩。
6楼2013-12-06 17:25:02
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花花贝

金虫 (知名作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
能达到实验目的即可呀 实在不行 换试剂盒 Takara Omega都挺好用的
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7楼2013-12-06 18:22:55
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冰风颤木

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你好 关于你的问题回答如下：
1、你提取质粒的目的是做什么？如果是酶切连接什么的 不管在意OD260/OD280，只要你连接成功就好了；
2、你是药物化学专业的 怎么去做生物了啊？很好奇啊
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船到桥头自然直
8楼2013-12-07 21:29:20
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来丹玉

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 冰风颤木 at 2013-12-07 21:29:20
你好 关于你的问题回答如下：
1、你提取质粒的目的是做什么？如果是酶切连接什么的 不管在意OD260/OD280，只要你连接成功就好了；
2、你是药物化学专业的 怎么去做生物了啊？很好奇啊

我要获得大量的目标DNA，用大肠杆菌扩增的。。原来本科是制药的，现在研究生方向要用到

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9楼2014-06-03 20:00:18
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来丹玉

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 花花贝 at 2013-12-06 18:22:55
能达到实验目的即可呀 实在不行 换试剂盒 Takara Omega都挺好用的

用碱裂解液，酚氯仿提的

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10楼2014-06-03 20:01:35
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