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来丹玉

新虫 (初入文坛)

[交流] 质粒DNA扩增后OD260/OD280总是大于2 已有8人参与

我用碱裂解法抽提的质粒DNA,OD260/OD280总是大于2,网上查的说大于2是RNA污染了,可是我加了RNaseA的啊,可能是哪一步的问题??
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冰风颤木

金虫 (正式写手)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你好 关于你的问题回答如下:
1、你提取质粒的目的是做什么?如果是酶切连接什么的 不管在意OD260/OD280,只要你连接成功就好了;
2、你是药物化学专业的 怎么去做生物了啊?很好奇啊
船到桥头自然直
8楼2013-12-07 21:29:20
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wlsino

金虫 (小有名气)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-06-04 08:25:40
不要相信这个值,太多因素会影响了,几乎没有任何实用意义
看nanodrop的吸收曲线形状就可以了

确定RNA污染最好的办法就是跑胶。
2楼2013-12-06 13:13:30
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huahu3600

新虫 (小有名气)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
稍微有点RNA没关系,加了RNaseA,也得给它起作用的条件呀
3楼2013-12-06 15:24:49
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逍遥e宝

铁杆木虫 (正式写手)

我爱黄赌毒

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
抽质粒的时候,RNASEA 要37℃水浴1h的……
无数老鼠的生命祭奠了我被偷走的那五年---------------forever宝
4楼2013-12-06 16:30:56
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