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aotoulan

禁虫 (小有名气)

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aotoulan

禁虫 (小有名气)

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20楼2015-01-20 17:22:21
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普通回帖

稻稻

铜虫 (著名写手)

有点看不懂,你的意思是用提取的质粒做模板可以P出来但是质粒直接电泳看不到条带?

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
做一个不动声色的人,不准情绪化,不准回头看。
2楼2015-01-04 23:57:33
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aotoulan

禁虫 (小有名气)

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3楼2015-01-05 12:37:59
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稻稻

铜虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by aotoulan at 2015-01-05 12:37:59
如图上,我要提两种质粒,但提出来没有明显的质粒条带,用这个去做PCR验证的话能有目的条带...

哦,你用加溶液3离心后的上清来做pcr能扩出条带是吧?后面沉淀那一步是不是也看不到白色沉淀?

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
做一个不动声色的人,不准情绪化,不准回头看。
4楼2015-01-05 13:00:26
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稻稻

铜虫 (著名写手)

我不是太清楚你的意思,你左边两个是菌落P C R,右边两个是提取的质粒?目的片段不到200b p吧?我师弟最近在构建载体,他是提出来的质粒做pcr能扩出来,但是酶切验证切不出来,很诡异…

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
做一个不动声色的人,不准情绪化,不准回头看。
5楼2015-01-05 13:08:22
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鱼大喵

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
aotoulan: 金币+1, 有帮助 2015-01-07 22:49:49
继续往下做表达看看呗。要不就拿这个提取的质粒再转top10,多摇点菌再重提
6楼2015-01-05 13:19:20
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aotoulan

禁虫 (小有名气)

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7楼2015-01-05 13:56:58
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aotoulan

禁虫 (小有名气)

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8楼2015-01-05 13:58:37
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781055707

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你觉得质粒小提试剂盒没问题的话,从转化进DH5A感受态吧,TOP10我也长在这个感受态上出问题。问下楼主,你用的是什么质粒呀。PUC吗?
采菊东篱下,悠然见南山。
9楼2015-01-05 16:39:04
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aotoulan

禁虫 (小有名气)

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10楼2015-01-05 18:25:37
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