【答案】应助回帖

采菊东篱下，悠然见南山。

11楼2015-01-06 09:45:23

aotoulan

禁虫 (小有名气)

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12楼2015-01-06 13:48:58

781055707

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引用回帖:

12楼: Originally posted by aotoulan at 2015-01-06 13:48:58
用试剂盒提取我也能提取出来，3ml过夜菌提出来的浓度和你的差不多，这不试剂盒用完了只有自己配试剂提了，幸好昨天发现了别的试剂盒，几个试剂盒拼凑起来已经提出来了。只是想知道为什么这个没提出来？...

几个试剂盒拼凑起来能提出来，自己配的提不出来，试剂的PH,SDS,NAOH,H2SO4很难保证每样都好用的呀。楼主你知道试剂盒里每样化学物的作用吗？

采菊东篱下，悠然见南山。

13楼2015-01-06 14:19:41

aotoulan

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14楼2015-01-06 15:15:33

梦影清扬

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【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
aotoulan: 金币+2, ★有帮助, 我想我已经找到了原因了后面试试 2015-01-07 22:53:51

看电泳图，还是有质粒提取出来的（有白色条带），PCR扩增还是可以出目的条带的，但是酶切的话还是少了。如果需要浓度高的质粒可以增加样本数。或者你要看离心取上清时有没有把沉淀也洗去了。

15楼2015-01-07 11:05:56

翼在天

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【答案】应助回帖

首先，PCR的灵敏度比较高，你在之前做菌落PCR是如果直接从转化体系的平板上挑菌，可能沾染上未转入菌体的连接好的质粒，也会有目的条带出现；其次，碱抽提所得的质粒会存在一定程度的菌体DNA和RNA的污染，如果目的片段在原菌基因组中存在，那么用质粒小提所得的洗脱液进行PCR也有可能出现目的条带（以原菌DNA为模板）

16楼2015-01-08 11:20:42