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aotoulan

禁虫 (小有名气)

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翼在天

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

首先,PCR的灵敏度比较高,你在之前做菌落PCR是如果直接从转化体系的平板上挑菌,可能沾染上未转入菌体的连接好的质粒,也会有目的条带出现;其次,碱抽提所得的质粒会存在一定程度的菌体DNA和RNA的污染,如果目的片段在原菌基因组中存在,那么用质粒小提所得的洗脱液进行PCR也有可能出现目的条带(以原菌DNA为模板)
16楼2015-01-08 11:20:42
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稻稻

铜虫 (著名写手)

有点看不懂,你的意思是用提取的质粒做模板可以P出来但是质粒直接电泳看不到条带?

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
做一个不动声色的人,不准情绪化,不准回头看。
2楼2015-01-04 23:57:33
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aotoulan

禁虫 (小有名气)

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3楼2015-01-05 12:37:59
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稻稻

铜虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by aotoulan at 2015-01-05 12:37:59
如图上,我要提两种质粒,但提出来没有明显的质粒条带,用这个去做PCR验证的话能有目的条带...

哦,你用加溶液3离心后的上清来做pcr能扩出条带是吧?后面沉淀那一步是不是也看不到白色沉淀?

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
做一个不动声色的人,不准情绪化,不准回头看。
4楼2015-01-05 13:00:26
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