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aotoulan

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20楼2015-01-20 17:22:21

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稻稻

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有点看不懂，你的意思是用提取的质粒做模板可以P出来但是质粒直接电泳看不到条带？

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2楼2015-01-04 23:57:33

aotoulan

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3楼2015-01-05 12:37:59

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引用回帖:

3楼: Originally posted by aotoulan at 2015-01-05 12:37:59
如图上，我要提两种质粒，但提出来没有明显的质粒条带，用这个去做PCR验证的话能有目的条带...

哦，你用加溶液3离心后的上清来做pcr能扩出条带是吧？后面沉淀那一步是不是也看不到白色沉淀？

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4楼2015-01-05 13:00:26

稻稻

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我不是太清楚你的意思，你左边两个是菌落P C R，右边两个是提取的质粒？目的片段不到200b p吧？我师弟最近在构建载体，他是提出来的质粒做pcr能扩出来，但是酶切验证切不出来，很诡异…

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5楼2015-01-05 13:08:22

鱼大喵

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【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
aotoulan: 金币+1, ★有帮助 2015-01-07 22:49:49

继续往下做表达看看呗。要不就拿这个提取的质粒再转top10，多摇点菌再重提

6楼2015-01-05 13:19:20

aotoulan

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7楼2015-01-05 13:56:58

aotoulan

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8楼2015-01-05 13:58:37

781055707

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【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

你觉得质粒小提试剂盒没问题的话，从转化进DH5A感受态吧，TOP10我也长在这个感受态上出问题。问下楼主，你用的是什么质粒呀。PUC吗？

采菊东篱下，悠然见南山。

9楼2015-01-05 16:39:04

aotoulan

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10楼2015-01-05 18:25:37