应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 切胶回收100bp的片段，回收后跑电泳没有条带
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
201/2返回列表12下一页
查看: 2631  |  回复: 19
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

spirit_free

金虫 (小有名气)

[求助] 切胶回收100bp的片段，回收后跑电泳没有条带 已有9人参与

如题，PCR得到的产物约100bp，将目的片段切胶回收后进行酶切，酶切后跑电泳目的条带很亮，但是再将酶切后的目的片段切胶回收，跑电泳发现没有条带，同时做的2000多bp的片段没有问题，重复3次都是这种现象，求各位大神帮忙分析下原因~~
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2015-01-03 23:25:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

yzj926521

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2015-01-04 12:50:43
回收2000bp和100bp中间步骤是有差别的，用于回收大片段的试剂盒回收小片段时需要有异丙醇处理一步的，或者你用专门用于小片段回收的盒子来做
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2015-01-04 08:56:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

甲方不怕乙方

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2015-01-04 12:50:39
严格按照试剂盒操作应该没问题的 仔细看一遍说明书

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
我要让你的生活因为有我而更精彩
2楼2015-01-03 23:28:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

布丁小晓

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
胶回收后，点样时点几ul？多点几ul试试。有没有测胶回收后的浓度？
赞一下 回复此楼
4楼2015-01-04 17:28:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

1009238055

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 2015-01-07 22:47:26
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回贴交流 2015-01-07 22:47:39
胶回收效率一般都不会很高的，更何况这么小的片段还来了两遍。建议楼主下次酶切后用PCR产物回收试剂盒，效率很高的。或者胶回收后电泳上样量弄大点，片段太小结合的核酸染料就比较少，看不到很正常。
赞一下 回复此楼
5楼2015-01-04 21:32:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dehong1573

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
3楼: Originally posted by yzj926521 at 2015-01-04 08:56:49
回收2000bp和100bp中间步骤是有差别的，用于回收大片段的试剂盒回收小片段时需要有异丙醇处理一步的，或者你用专门用于小片段回收的盒子来做

楼上正解，片段太小，不能和常规的一样做
赞一下 回复此楼
科学永无止境,只有合作共享才能更好地……
6楼2015-01-05 08:35:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ccandcc

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
2000bp是100bp亮度20倍，你觉得能分辨出来吗
我也认为你收到了，对于回收的直接pcr估计就能看到了
赞一下 回复此楼
7楼2015-01-06 08:20:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ls2046

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回贴交流 2015-01-07 22:48:02
100bp太小，一般的回收试剂盒回收效率那是相当的差，仔细看看试剂盒的试剂回收片段范围。应该是试剂盒的问题。
赞一下 回复此楼
一品黄山
8楼2015-01-06 09:25:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

781055707

木虫 (著名写手)
你可以按试剂盒上的方法加异丙醇。试试，效果好的话，和大家分享一下。
赞一下 回复此楼
采菊东篱下，悠然见南山。
9楼2015-01-06 10:02:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

李小同

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
小片段十有八九是从柱子上漏下去了
赞一下 回复此楼
10楼2015-01-06 11:31:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 spirit_free 的主题更新
201/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 352分-085602-一志愿985 +5 海纳百川Ly 2026-03-29 5/250 2026-03-29 09:57 by Sjndkwm
[考研] 0703 化学 求调剂，一志愿山东大学 342 分 +4 Shern—- 2026-03-28 4/200 2026-03-29 00:47 by 544594351
[考研] 一志愿郑州大学，080500学硕，总分317分求调剂 +5 举个栗子oi 2026-03-24 6/300 2026-03-28 23:03 by lizhi8172
[考研] 一志愿北化085600材料专硕275|有文章专利｜求调剂 +7 Micky11223 2026-03-25 7/350 2026-03-28 18:34 by 无际的草原
[考研] 求化学调剂 +4 wulanna 2026-03-28 4/200 2026-03-28 13:37 by 唐沐儿
[考研] 材料与化工（0856）304求B区调剂 +8 邱gl 2026-03-27 8/400 2026-03-28 12:42 by 唐沐儿
[考研] 085404求调剂，总分309，本科经历较为丰富 +4 来财aa 2026-03-25 4/200 2026-03-28 07:41 by 棒棒球手
[考研] 352分 化工与材料 +5 海纳百川Ly 2026-03-27 5/250 2026-03-28 03:39 by fmesaito
[考研] 265求调剂 +8 小木虫085600 2026-03-27 8/400 2026-03-27 22:16 by 无际的草原
[考研] 085600材料与化工调剂 +10 A-哆啦Z梦 2026-03-23 16/800 2026-03-27 15:13 by caszguilin
[考研] 286求调剂 +4 lim0922 2026-03-26 4/200 2026-03-27 10:28 by guoweigw
[考研] 336材料求调剂 +7 陈滢莹 2026-03-26 9/450 2026-03-27 00:20 by wxiongid
[考研] 一志愿北化求调剂 +3 Jsman 2026-03-22 3/150 2026-03-26 21:06 by ajpv风雷
[考研] 材料考研求调剂 +3 Dendel 2026-03-23 6/300 2026-03-26 17:51 by fmesaito
[考研] 085602 289分求调剂 +8 WWW西西弗斯 2026-03-24 8/400 2026-03-26 16:33 by 不吃魚的貓
[考研] 一志愿天津大学339材料与化工求调剂 +3 江往卖鱼 2026-03-26 3/150 2026-03-26 09:42 by 王小欠i
[考研] 打过很多竞赛，085406控制工程300分，求调剂 +3 askeladz 2026-03-26 3/150 2026-03-26 09:08 by 给你你注意休息
[考研] 26考研-291分-厦门大学（085601）-柔性电子学院材料工程专业求调剂 +3 min3 2026-03-24 4/200 2026-03-25 18:22 by xcjcqu
[考研] 材料专硕331求调剂 +4 鲜当牛 2026-03-24 4/200 2026-03-24 15:58 by JourneyLucky
[考研] 一志愿河北工业大学0817化工278分求调剂 +7 jhybd 2026-03-23 12/600 2026-03-24 09:03 by jhybd
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭