应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 切胶回收100bp的片段，回收后跑电泳没有条带
202/2返回列表上一页12
查看: 2924  |  回复: 19
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

spirit_free

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by yzj926521 at 2015-01-04 08:56:49
回收2000bp和100bp中间步骤是有差别的，用于回收大片段的试剂盒回收小片段时需要有异丙醇处理一步的，或者你用专门用于小片段回收的盒子来做

加了异丙醇的，盒子是可以最小回收50bp片段的，目前觉得是2次回收，回收效率太低T T
赞一下 回复此楼
11楼2015-01-07 10:15:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

spirit_free

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 布丁小晓 at 2015-01-04 17:28:32
胶回收后，点样时点几ul？多点几ul试试。有没有测胶回收后的浓度？

点了5ul 没有测浓度
赞一下 回复此楼
12楼2015-01-07 10:16:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

spirit_free

金虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by ccandcc at 2015-01-06 08:20:59
2000bp是100bp亮度20倍，你觉得能分辨出来吗
我也认为你收到了，对于回收的直接pcr估计就能看到了

可能是收到了，但是浓度太低，没办法进行后续实验T T
赞一下 回复此楼
13楼2015-01-07 10:18:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

spirit_free

金虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 781055707 at 2015-01-06 10:02:25
你可以按试剂盒上的方法加异丙醇。试试，效果好的话，和大家分享一下。

是加了异丙醇的，效果也不是很好，小片段还是二次回收，回收效率低。
赞一下 回复此楼
14楼2015-01-07 10:21:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

781055707

木虫 (著名写手)
引用回帖:
14楼: Originally posted by spirit_free at 2015-01-07 10:21:36
是加了异丙醇的，效果也不是很好，小片段还是二次回收，回收效率低。...

哦，希望楼主连上呀。
赞一下 回复此楼
采菊东篱下，悠然见南山。
15楼2015-01-07 13:28:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

倩倩的千千结

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

是不是你回收胶的范围不够小，酶切后片段更小了，导致柱子上无法挂载
赞一下 回复此楼
16楼2015-01-07 13:47:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

0616102018

木虫 (小有名气)
★ ★
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回贴交流 2015-01-07 22:48:36
告诉你个简单方法，切胶后按试剂盒说明加入溶胶液，溶解。然后，根据体积加入体积80％的异丙醇沉淀半个小时，离心，加入75％的乙醇洗，晾干。加水溶解即可。试剂盒的柱子都只能回收一定大小范围的片段，小片段回收的话对试剂盒的柱子要求比较高。或者你用进口试剂盒也可以回收得到。祝你好运。。。。
赞一下 回复此楼
有勇气就会有奇迹！
17楼2015-01-07 15:06:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

spirit_free

金虫 (小有名气)
引用回帖:
17楼: Originally posted by 0616102018 at 2015-01-07 15:06:49
告诉你个简单方法，切胶后按试剂盒说明加入溶胶液，溶解。然后，根据体积加入体积80％的异丙醇沉淀半个小时，离心，加入75％的乙醇洗，晾干。加水溶解即可。试剂盒的柱子都只能回收一定大小范围的片段，小片段回收的 ...

谢谢！学习了，去试试~
赞一下 回复此楼
18楼2015-01-07 22:56:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

implicitly

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
18楼: Originally posted by spirit_free at 2015-01-07 22:56:34
谢谢！学习了，去试试~...

结果如何
回复此楼
19楼2015-01-11 19:46:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cong1921

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
18楼: Originally posted by spirit_free at 2015-01-07 22:56:34
谢谢！学习了，去试试~...

能不能给个详细些的步骤啊，我刚刚做实验，也遇到这样的问题
赞一下 回复此楼
20楼2015-04-20 21:37:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 spirit_free 的主题更新
202/2返回列表上一页12
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 基金中了 +14 laoda193707 2026-08-06 14/700 2026-08-08 00:23 by 实验小白ha
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] 娱乐 +6 Tide man 2026-08-03 6/300 2026-08-07 22:40 by 铁帽子农民
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变，有变的大神么？ +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
[基金申请] 关于代码变化问题，想知道的进来 +9 且听虎啸 2026-08-07 12/600 2026-08-07 21:53 by 理想三旬2025
[基金申请] 固定端突然变了，今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +3 布布和一二 2026-08-07 3/150 2026-08-07 15:09 by gltch
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
[论文投稿] 十年后又回来了，论文投稿求助 +4 哈哈114477 2026-08-01 4/200 2026-08-07 14:39 by jgy194592
[基金申请] 大家散了吧，后缀研究没有意义，别浪费时间了，过好目前的每一天，不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +4 yang182083 2026-08-06 6/300 2026-08-07 12:43 by 虫友是什么虫
[基金申请] filecode +14 等待解的谜 2026-08-06 19/950 2026-08-07 12:20 by wlwhappy
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
[基金申请] 求各位大神看下 100+6 hpkpkpkp 2026-08-05 33/1650 2026-08-06 14:49 by zhiyanjiang
[基金申请] 影响面上的因素 +8 布布和一二 2026-08-05 11/550 2026-08-06 10:41 by 宝贝虫子
[基金申请] 8月时间戳变的，举个手。玩一下，释放压力 +9 archvillain 2026-08-04 11/550 2026-08-05 20:06 by wlwhappy
[基金申请] 好消息？这个有何含义？？？ +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
[考博] 【2027博士申请】纳米药物递送方向 20+3 13586093586 2026-08-03 4/200 2026-08-05 09:59 by lfy8008
[基金申请] 面上提前没消息，有中的吗 +14 archvillain 2026-08-02 18/900 2026-08-04 14:42 by archvillain
[基金申请] 什么时候能放榜呀？ +3 Jacob678 2026-08-03 3/150 2026-08-03 16:14 by gltch
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭