24小时热门版块排行榜    

查看: 2480  |  回复: 19

spirit_free

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by yzj926521 at 2015-01-04 08:56:49
回收2000bp和100bp中间步骤是有差别的,用于回收大片段的试剂盒回收小片段时需要有异丙醇处理一步的,或者你用专门用于小片段回收的盒子来做

加了异丙醇的,盒子是可以最小回收50bp片段的,目前觉得是2次回收,回收效率太低T T
11楼2015-01-07 10:15:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

spirit_free

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 布丁小晓 at 2015-01-04 17:28:32
胶回收后,点样时点几ul?多点几ul试试。有没有测胶回收后的浓度?

点了5ul 没有测浓度
12楼2015-01-07 10:16:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

spirit_free

金虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by ccandcc at 2015-01-06 08:20:59
2000bp是100bp亮度20倍,你觉得能分辨出来吗
我也认为你收到了,对于回收的直接pcr估计就能看到了

可能是收到了,但是浓度太低,没办法进行后续实验T T
13楼2015-01-07 10:18:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

spirit_free

金虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by 781055707 at 2015-01-06 10:02:25
你可以按试剂盒上的方法加异丙醇。试试,效果好的话,和大家分享一下。

是加了异丙醇的,效果也不是很好,小片段还是二次回收,回收效率低。
14楼2015-01-07 10:21:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

781055707

木虫 (著名写手)

引用回帖:
14楼: Originally posted by spirit_free at 2015-01-07 10:21:36
是加了异丙醇的,效果也不是很好,小片段还是二次回收,回收效率低。...

哦,希望楼主连上呀。
采菊东篱下,悠然见南山。
15楼2015-01-07 13:28:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

倩倩的千千结

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

是不是你回收胶的范围不够小,酶切后片段更小了,导致柱子上无法挂载
16楼2015-01-07 13:47:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

0616102018

木虫 (小有名气)

★ ★
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回贴交流 2015-01-07 22:48:36
告诉你个简单方法,切胶后按试剂盒说明加入溶胶液,溶解。然后,根据体积加入体积80%的异丙醇沉淀半个小时,离心,加入75%的乙醇洗,晾干。加水溶解即可。试剂盒的柱子都只能回收一定大小范围的片段,小片段回收的话对试剂盒的柱子要求比较高。或者你用进口试剂盒也可以回收得到。祝你好运。。。。
有勇气就会有奇迹!
17楼2015-01-07 15:06:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

spirit_free

金虫 (小有名气)

引用回帖:
17楼: Originally posted by 0616102018 at 2015-01-07 15:06:49
告诉你个简单方法,切胶后按试剂盒说明加入溶胶液,溶解。然后,根据体积加入体积80%的异丙醇沉淀半个小时,离心,加入75%的乙醇洗,晾干。加水溶解即可。试剂盒的柱子都只能回收一定大小范围的片段,小片段回收的 ...

谢谢!学习了,去试试~
18楼2015-01-07 22:56:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

implicitly

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
18楼: Originally posted by spirit_free at 2015-01-07 22:56:34
谢谢!学习了,去试试~...

结果如何
19楼2015-01-11 19:46:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cong1921

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
18楼: Originally posted by spirit_free at 2015-01-07 22:56:34
谢谢!学习了,去试试~...

能不能给个详细些的步骤啊,我刚刚做实验,也遇到这样的问题
20楼2015-04-20 21:37:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 spirit_free 的主题更新
信息提示
请填处理意见