24小时热门版块排行榜    

查看: 1598  |  回复: 7
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

chuiwen

银虫 (著名写手)

[求助] 各位大神:real time PCR曲线求解 已有4人参与

各位大神好,小生最近做一个基因的Real-TimePCR,退火温度为52度和56度均试一次,56度明显不行。52度相对还凑合,但是曲线结果比较调皮:扩增曲线平台期升高之后往下降,熔解曲线目的基因峰值过低,求问诸位大侠这种情况肿么破?(三步PCR,退火温度52度30s)
怎么能让52度时的平台更稳,熔解曲线峰值更高呢?
多谢多谢,感激涕零!
初次尝试,结果不好看,诸位见笑啦

各位大神:real time PCR曲线求解
52度扩增曲线.jpg


各位大神:real time PCR曲线求解-1
52度熔解曲线.jpg


各位大神:real time PCR曲线求解-2
56度扩增曲线.jpg


各位大神:real time PCR曲线求解-3
56度熔解曲线.jpg
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

QPCR 问题简答

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

...
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chuiwen

银虫 (著名写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by ouzhiying at 2014-12-08 08:59:26
相对而言,56度可以,平台期较稳定,CT值24-27,但没看到你的阴性对照

56度时, 熔解曲线的峰在低温下出现了一大坨,各种东西~这也可以吗?

[ 发自小木虫客户端 ]
...
7楼2014-12-08 09:58:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

纯正天然

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
chuiwen: 金币+10, 有帮助, 谢谢,引物已经设计过了~但是觉得这对引物还是有可能改善的 2014-12-07 21:18:44
还是重新设计特异性引物吧!基本没什么产物产生啊!
2楼2014-12-07 20:10:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yzj926521

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
chuiwen: 金币+2, 有帮助 2014-12-08 09:54:15
chuiwen: 金币+10, ★★★很有帮助, 确实是引物太差劲~刚想起来还在这里问问题了,谢谢 2014-12-19 17:48:52
引物不合适,重新设计吧
3楼2014-12-08 08:38:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ouzhiying

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
chuiwen: 金币+2 2014-12-08 09:58:26
相对而言,56度可以,平台期较稳定,CT值24-27,但没看到你的阴性对照
4楼2014-12-08 08:59:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[论文投稿] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 zICmwzsBXjbN 2026-08-29 5/250 2026-08-30 20:08 by hZiFeudZyoGR
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 jCd0dEvKHShX 2026-08-29 4/200 2026-08-30 19:57 by hZiFeudZyoGR
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 AVl0JAsg9hyo 2026-08-29 5/250 2026-08-30 19:57 by hZiFeudZyoGR
[考研] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 jCd0dEvKHShX 2026-08-29 5/250 2026-08-30 19:37 by hZiFeudZyoGR
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 jCd0dEvKHShX 2026-08-29 5/250 2026-08-30 19:23 by hZiFeudZyoGR
[论文投稿] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +5 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 5/250 2026-08-30 18:29 by hZiFeudZyoGR
[博后之家] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +7 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 8/400 2026-08-30 18:07 by hZiFeudZyoGR
[论文投稿] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +5 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 6/300 2026-08-30 17:25 by hZiFeudZyoGR
[教师之家] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 8/400 2026-08-30 05:48 by ZPa0EcMwuECS
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +4 bud_bud 2026-08-27 7/350 2026-08-29 07:23 by foolishmani
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高,自己申请怎么就这么难 +12 Kittylucky 2026-08-27 13/650 2026-08-29 00:04 by superceng
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 申请删除本帖 +6 lyz123lyz 2026-08-27 7/350 2026-08-27 17:31 by 宁静致远sy
[基金申请] 基金未中,这种答复是模板吗? +5 zhaosm1982 2026-08-27 6/300 2026-08-27 16:00 by lfy8008
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜? 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 出来了 +9 trojank 2026-08-26 9/450 2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 某些机构,以效率低为荣,以效率低作为存在感 +9 yuleib84 2026-08-25 10/500 2026-08-25 17:14 by alexon
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑,不妨来听听这首《基金之外》 +8 scalable 2026-08-24 8/400 2026-08-25 12:52 by jnhyjjm
信息提示
请填处理意见