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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 和同学做的Realtime PCR的结果相反，为什么？
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moqiyilei

金虫 (小有名气)

[求助] 和同学做的Realtime PCR的结果相反，为什么？ 已有4人参与

检测突变体中某基因的表达量，我做出来的结果是表达量下调的，和我一级的一个同学检测出来是表达量上调的。数据处理方法是一样的，为什么结果恰好相反呢？也不知道哪里出问题了，纠结~
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1楼 2014-12-02 16:40:06
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zshw_001

金虫 (小有名气)

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★
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moqiyilei(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-12-02 18:40:15
目测人为操作的问题，或者就是你处理时样品已降解。
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永远相信未知的总是美好的！
2楼2014-12-02 17:30:35
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lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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moqiyilei(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-12-02 18:40:26
样品出问题了，RNA没提好，或没反转好。建议多做生物学重复。再一个你把你和你同学的样品再做重做一次，看看结果能不能重复。
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hehe
3楼2014-12-02 17:46:46
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意萧02

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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试问，重复操作也这样吗？

[ 发自小木虫客户端 ]
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4楼2014-12-02 17:46:48
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biotech_zhou

木虫 (著名写手)

待人以诚：专业/专注/专心

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
拿你的和你同学的做重复，问题出现在哪，先验证了再说，别这么快下结论！
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5楼2014-12-03 11:06:40
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moqiyilei

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by lvbobo823 at 2014-12-02 17:46:46
样品出问题了，RNA没提好，或没反转好。建议多做生物学重复。再一个你把你和你同学的样品再做重做一次，看看结果能不能重复。

提完RNA跑过胶，应该没有降解。我和同学用的是一个反转体系，反转过程中会出现什么问题呢？
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6楼2014-12-23 10:43:05
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lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by moqiyilei at 2014-12-23 10:43:05
提完RNA跑过胶，应该没有降解。我和同学用的是一个反转体系，反转过程中会出现什么问题呢？...

反转不好检测，你做定量时多做几个内参试试，看内参别出问题。
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hehe
7楼2014-12-23 21:30:49
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