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machao8405

木虫 (正式写手)

[求助] RNA提取,关于样品研磨 已有14人参与

在样品研磨中,总是一个体力活还是一个细心的活,特别是样品量比较大的时候。之前都是在液氮中研钵里研磨的,一天最多抽提48个样品,还要及时做RT-PCR,感觉很累。大家有没有用过像个小电钻一样的研磨器(一次一个)?或者是放进去一个钢珠的震荡式的那种研磨器(一次大量)?或者有更好的研磨方法?
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
还是液氮研磨的靠谱

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2014-12-01 21:57:46
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宋伟同学

铜虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
听没听说过磁珠法或磁棒法核酸提取仪。我问过好几家,都是大概60万左右一台。你看自己条件吧,我硕导曾经很感兴趣,一听60万,说,把咱仨卖了吧。呵呵。
7楼2014-12-02 17:29:06
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普通回帖

稻稻

铜虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
那个很粗放,我们提大批量DNA时才会用。建议别那么做。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
做一个不动声色的人,不准情绪化,不准回头看。
3楼2014-12-01 23:00:13
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biotech_zhou

木虫 (著名写手)

待人以诚:专业/专注/专心

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
实验有时候就是个体力活,还是老实用液氮研磨吧。
年末优惠荧光定量pcr、WB、ELISA技术服务一律六折!交流锤炼知识,用心构筑桥梁,以更优质的产品及技术服务助力科研;QQ:2513165427;Email:b
4楼2014-12-02 10:46:22
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lilei2008syc

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
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machao8405(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-12-02 18:39:21
那个研磨的不够充分,效果不如手动研磨,之前有师兄用过,只是很碎,却不是粉末
5楼2014-12-02 11:31:23
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jiebingzh

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
machao8405(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-12-02 18:39:31
高通量组织研磨仪,我用过新芝的192,在液氮中冻得足够久的话,研磨效果挺好的。
6楼2014-12-02 16:34:20
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意萧02

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
machao8405(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-12-02 18:39:51
RNA还是一个一个手动磨比较靠谱,大批量降解的可能性超大,不信你试试。我用过电钻,还有钢珠的震荡器,一次96个样的那种,效果很差,还急得半死!

[ 发自小木虫客户端 ]
8楼2014-12-02 17:49:49
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lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
machao8405(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-12-02 18:40:01
我实验室有用过震荡式的研磨器研磨过样不要太多效果还可以。如果样品多再一个建议你分几天提,每次提取的RNA保存到异丙醇或70%酒精里,统一反转。
hehe
9楼2014-12-02 17:50:14
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毅坚

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
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machao8405(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-12-02 20:41:45
您好,液氮研磨要比组织破碎仪的条件更加温和,一般效果会更好的。液氮研磨咋一看像个粗活,但真正要又快又好地把样品研成均匀粉末状还是要些技巧的,需要你自己拿捏一些节奏并不断通过实际操作练习。对于大批量的样品,液氮研磨可能会显得效率不高,个人建议可以做个预实验:研磨VS破碎。通过后期效果对比决定用那种方法,我之前150多个苹果叶片就是用破碎仪处理的,效果跟研磨不相上下,省了不少事,不过也是要看具体样品的情况而定的。可以自己总结一些适合破碎的样品类型,对于后续工作很有帮助,会让你觉得得心应手的。
10楼2014-12-02 19:01:13
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