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我是小纯洁

金虫 (正式写手)

[求助] 拟南芥RNA提取的怪事

拟南芥研磨后,加入trizol冰上10min后,加入氯仿,剧烈震荡15s,没有分层,离心后也没有分层。
我怕是我加叶片过多,又多加了trizol,发现没有用,然后又多加了氯仿也没有用。。。。
求解为什么?
我以前提取过好多次rna,都没有问题。不知道这次是怎么了。
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小鸟剑客

金虫 (小有名气)

我是小纯洁: 回帖置顶 2012-05-17 16:35:57
可以肯定是氯仿出问题了,看清楚是氯仿的瓶子吗,我觉得Trizol应该出问题可能性很小。你的过程应该没问题,不过建议你加氯仿后多摇几分钟,虽然说明书上说15S,但是5分钟左右上下摇动我觉得最好。样品多少应该跟分层没多大关系
9楼2012-05-17 16:31:52
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普通回帖

longrna

新虫 (正式写手)

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★ ★ ★
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小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-05-15 15:43:05
我是小纯洁: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-05-17 00:42:52
氯仿有问题...要么Trizol有问题。从化学角度来说是不可能不分层的。
拟南芥是很好做的植物样品。
伟大航线....
2楼2012-05-15 12:19:54
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姜传军

金虫 (小有名气)

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★ ★
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我是小纯洁: 金币+2, 有帮助, 谢谢回复,可能你做的是动物,植物没有听说过谁还离心的。。。 2012-05-17 00:43:50
你研磨后不离心去除沉淀吗?

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
风逝
3楼2012-05-16 08:46:43
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zqx128

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
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我是小纯洁: 金币+6, ★★★很有帮助 2012-05-17 00:43:58
建议重新换一下试剂试试。
4楼2012-05-16 09:08:26
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hyacinth326

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


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小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-05-16 16:08:27
trizol跟氯仿应该是分层的,怀疑是试剂的问题,难不成你的拟南芥里有东西能够促使两者互溶?感觉这样的几率实在是很低的
5楼2012-05-16 09:20:02
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shoufangche

金虫 (小有名气)

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我一般在加入trizol放置10min后离心,再加氯仿,你可以试试!
6楼2012-05-16 10:39:34
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我是小纯洁

金虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by shoufangche at 2012-05-16 10:39:34:
我一般在加入trizol放置10min后离心,再加氯仿,你可以试试!

谢谢~~我自己的方法就是放置10min,帖子说的很明白了。不过还是谢谢你的回复!
7楼2012-05-17 00:45:48
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shoufangche

金虫 (小有名气)

我说的是放置后离心,再加氯仿
8楼2012-05-17 08:59:03
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fanfenggui

金虫 (正式写手)

估计试剂出问题了,好好看看吧!我最近试验也不顺啊!加油啊!
爱由心起!
10楼2012-05-18 00:04:40
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