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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 拟南芥RNA提取的怪事
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我是小纯洁

金虫 (正式写手)

[求助] 拟南芥RNA提取的怪事

拟南芥研磨后，加入trizol冰上10min后，加入氯仿，剧烈震荡15s，没有分层，离心后也没有分层。
我怕是我加叶片过多，又多加了trizol，发现没有用，然后又多加了氯仿也没有用。。。。
求解为什么？
我以前提取过好多次rna，都没有问题。不知道这次是怎么了。
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1楼 2012-05-15 10:33:29
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回帖置顶 ( 共有1个 )

小鸟剑客

金虫 (小有名气)
我是小纯洁: 回帖置顶 2012-05-17 16:35:57
可以肯定是氯仿出问题了，看清楚是氯仿的瓶子吗，我觉得Trizol应该出问题可能性很小。你的过程应该没问题，不过建议你加氯仿后多摇几分钟，虽然说明书上说15S，但是5分钟左右上下摇动我觉得最好。样品多少应该跟分层没多大关系
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9楼2012-05-17 16:31:52
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普通回帖

longrna

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
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小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-05-15 15:43:05
我是小纯洁: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-05-17 00:42:52
氯仿有问题...要么Trizol有问题。从化学角度来说是不可能不分层的。
拟南芥是很好做的植物样品。
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伟大航线....
2楼2012-05-15 12:19:54
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姜传军

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
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我是小纯洁: 金币+2, ★有帮助, 谢谢回复，可能你做的是动物，植物没有听说过谁还离心的。。。 2012-05-17 00:43:50
你研磨后不离心去除沉淀吗？

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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风逝
3楼2012-05-16 08:46:43
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zqx128

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
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我是小纯洁: 金币+6, ★★★很有帮助 2012-05-17 00:43:58
建议重新换一下试剂试试。
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4楼2012-05-16 09:08:26
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hyacinth326

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-05-16 16:08:27
trizol跟氯仿应该是分层的，怀疑是试剂的问题，难不成你的拟南芥里有东西能够促使两者互溶？感觉这样的几率实在是很低的
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5楼2012-05-16 09:20:02
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shoufangche

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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我一般在加入trizol放置10min后离心，再加氯仿，你可以试试！
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6楼2012-05-16 10:39:34
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我是小纯洁

金虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by shoufangche at 2012-05-16 10:39:34:
我一般在加入trizol放置10min后离心，再加氯仿，你可以试试！

谢谢~~我自己的方法就是放置10min，帖子说的很明白了。不过还是谢谢你的回复！
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7楼2012-05-17 00:45:48
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shoufangche

金虫 (小有名气)
我说的是放置后离心，再加氯仿
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8楼2012-05-17 08:59:03
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fanfenggui

金虫 (正式写手)
估计试剂出问题了，好好看看吧！我最近试验也不顺啊！加油啊！
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爱由心起！
10楼2012-05-18 00:04:40
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