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onkelhero

木虫 (小有名气)

[交流] 植物细胞RNA提取用的研钵要高温灭菌么？ 已有12人参与

植物细胞RNA提取用的研钵要高温灭菌么？ 感觉低温研磨后就加入Trizol了，中间没有RNase发挥作用的空间啊？
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1楼 2012-12-20 16:42:41
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

drxiao2005

金虫 (小有名气)
★ ★ ★
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gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2012-12-22 19:02:32
根本不用。
植物组织中含有丰富的RNA酶。
在活细胞中，这些RNA酶一般不会大量降解RNA。
RNA提取液中一般含有RNA酶抑制剂。
所以应注意的地方是在RNA提取之后，特别是重悬在水溶液中后。
磨样的时候主要保证低温，别解冻。磨好后迅速转移到提取液中充分混匀。
不用处理研钵，也不用戴手套取样磨样。
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4楼2012-12-21 08:45:34
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starseacow

专家顾问 (职业作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我一般都会用DEPC水浸泡后，包上锡箔纸高温灭菌。做RNA多加小心为好。
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植物生理群69993869，为避免广告，申请加入请提供木虫昵称，院校及专业信息
2楼2012-12-20 18:26:59
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游侠892

铁杆木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我们实验室的做法是：锡箔纸包好，直接180℃烘烤4个小时左右，之后再放入-20℃冰箱中预冷备用。
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路漫漫其修远兮，吾将上下而求索
10楼2012-12-21 14:41:57
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xudabin98

木虫 (正式写手)
★
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引用回帖:
4楼: Originally posted by drxiao2005 at 2012-12-21 08:45:34
根本不用。
植物组织中含有丰富的RNA酶。
在活细胞中，这些RNA酶一般不会大量降解RNA。
RNA提取液中一般含有RNA酶抑制剂。
所以应注意的地方是在RNA提取之后，特别是重悬在水溶液中后。
磨样的时候主要保证低温 ...

你这个回复太果断，RNA提取液中一般含有RNA酶抑制剂，这个是不假，但是你要知道，抑制剂并不能够完全将所有的RNA酶全部抑制，肯定还会有一些会发挥作用的，酶动力学你应该好好看看。不知道你是否真的提取过RNA，提取的质量怎么样？研钵最好还是要处理的，你再细看看所有的试剂盒，上面都会标有经常更换新的手套，样品要带手套处理。
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11楼2012-12-21 15:59:46
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Renavatio

木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
可以在用之前用加点乙醇，烧一下再用
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Undefined！
3楼2012-12-21 00:33:54
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xubo7

木虫之王 (文坛精英)

小木虫
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
用酒精烧一下即可！
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人的品德很重要！！！不能失去德行！！！
5楼2012-12-21 09:07:21
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德国工兵铲

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
一般包好灭菌，有时候用酒精烧一下
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6楼2012-12-21 09:40:16
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和谐村

金虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我们实验室一般会用乙醇烧下，锡纸包好灭菌，完了打开锡纸倒适量乙醇烧着，完了就可以研磨提样了。
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7楼2012-12-21 10:08:37
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943820572

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我们的做法是：用DEPC过夜处理，然后灭菌3次，RNA酶到处都是，做是要小心否则提取效果不太好甚至会没有。
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8楼2012-12-21 10:36:55
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943820572

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我们的做法是：用DEPC过夜处理，然后灭菌3次，RNA酶到处都是，做是要小心否则提取效果不太好甚至会没有。
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9楼2012-12-21 10:39:20
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