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onkelhero

木虫 (小有名气)

[交流] 植物细胞RNA提取用的研钵要高温灭菌么?已有12人参与

植物细胞RNA提取用的研钵要高温灭菌么? 感觉低温研磨后就加入Trizol了,中间没有RNase发挥作用的空间啊?
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drxiao2005

金虫 (小有名气)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2012-12-22 19:02:32
根本不用。
植物组织中含有丰富的RNA酶。
在活细胞中,这些RNA酶一般不会大量降解RNA。
RNA提取液中一般含有RNA酶抑制剂。
所以应注意的地方是在RNA提取之后,特别是重悬在水溶液中后。
磨样的时候主要保证低温,别解冻。磨好后迅速转移到提取液中充分混匀。
不用处理研钵,也不用戴手套取样磨样。
4楼2012-12-21 08:45:34
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starseacow

专家顾问 (职业作家)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我一般都会用DEPC水浸泡后,包上锡箔纸高温灭菌。做RNA多加小心为好。
植物生理群69993869,为避免广告,申请加入请提供木虫昵称,院校及专业信息
2楼2012-12-20 18:26:59
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游侠892

铁杆木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我们实验室的做法是:锡箔纸包好,直接180℃烘烤4个小时左右,之后再放入-20℃冰箱中预冷备用。
路漫漫其修远兮,吾将上下而求索
10楼2012-12-21 14:41:57
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xudabin98

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by drxiao2005 at 2012-12-21 08:45:34
根本不用。
植物组织中含有丰富的RNA酶。
在活细胞中,这些RNA酶一般不会大量降解RNA。
RNA提取液中一般含有RNA酶抑制剂。
所以应注意的地方是在RNA提取之后,特别是重悬在水溶液中后。
磨样的时候主要保证低温 ...

你这个回复太果断,RNA提取液中一般含有RNA酶抑制剂,这个是不假,但是你要知道,抑制剂并不能够完全将所有的RNA酶全部抑制,肯定还会有一些会发挥作用的,酶动力学你应该好好看看。不知道你是否真的提取过RNA,提取的质量怎么样?研钵最好还是要处理的,你再细看看所有的试剂盒,上面都会标有经常更换新的手套,样品要带手套处理。
11楼2012-12-21 15:59:46
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Renavatio

木虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
可以在用之前用加点乙醇,烧一下再用
Undefined!
3楼2012-12-21 00:33:54
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xubo7

木虫之王 (文坛精英)

小木虫


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
用酒精烧一下即可!
人的品德很重要!!!不能失去德行!!!
5楼2012-12-21 09:07:21
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德国工兵铲

金虫 (小有名气)


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一般包好灭菌,有时候用酒精烧一下
6楼2012-12-21 09:40:16
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和谐村

金虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我们实验室一般会用乙醇烧下,锡纸包好灭菌,完了打开锡纸倒适量乙醇烧着,完了就可以研磨提样了。
7楼2012-12-21 10:08:37
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943820572

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我们的做法是:用DEPC过夜处理,然后灭菌3次,RNA酶到处都是,做是要小心否则提取效果不太好甚至会没有。
8楼2012-12-21 10:36:55
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943820572

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我们的做法是:用DEPC过夜处理,然后灭菌3次,RNA酶到处都是,做是要小心否则提取效果不太好甚至会没有。
9楼2012-12-21 10:39:20
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