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czcpudai

铜虫 (正式写手)

[求助] 提取RNA前如何除掉RNA酶~~高温灭菌121℃,2个小时是不是可以除掉RNA酶?

各位提取过RNA的同学,我想问一下RNA酶除了DEPC水处理后,连续高压灭菌121℃,2小时是不是可以除掉RNA酶????
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czcpudai

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 棉花糖+ at 2012-11-06 20:16:22
可以的,高压蒸汽灭菌30分钟即可,在之前最后用DEPC水浸泡24小时以上。枪头这样处理就可以了,试管最好购买已经处理好的。谢谢

,同意~   DEPC处理水要泡24小时吗?还是过夜(12个小时)即可呢?
9楼2012-11-06 20:51:05
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普通回帖

紫色的梦想

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
以前我提RNA的时候就是这么做的,还可以了。。不过你可以用试剂盒,买处理好的管子更方便点。
2楼2012-11-06 14:59:53
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czcpudai

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 紫色的梦想 at 2012-11-06 14:59:53
以前我提RNA的时候就是这么做的,还可以了。。不过你可以用试剂盒,买处理好的管子更方便点。

试剂盒还是蛮贵的哈,呵呵   您这样做之后RNA的完整性和纯度都还挺好的吧??? 谢谢!
3楼2012-11-06 15:10:11
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diandong

禁虫 (著名写手)

本帖内容被屏蔽

4楼2012-11-06 18:36:27
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czcpudai

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by diandong at 2012-11-06 18:36:27
180度,3h.

枪头要那么高的温度吗? 会不会直接化掉了?
5楼2012-11-06 18:51:03
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紫色的梦想

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我做的时候提的RNA质量挺好的。但是你要完全去除RNA酶是不可能的。
6楼2012-11-06 19:21:06
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竹子小小

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我们实验室121度1小时,操作戴手套口罩没什么问题
7楼2012-11-06 19:52:44
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棉花糖+

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-11-08 13:48:23
可以的,高压蒸汽灭菌30分钟即可,在之前最后用DEPC水浸泡24小时以上。枪头这样处理就可以了,试管最好购买已经处理好的。谢谢
8楼2012-11-06 20:16:22
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starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-11-08 13:48:31
最佳方法是直接买没有RNA酶的管子和枪头,一般进口产品都可以保证这一点,国产的最好DEPC水室温处理过夜,再高压灭菌121度 20分钟。
植物生理群69993869,为避免广告,申请加入请提供木虫昵称,院校及专业信息
10楼2012-11-07 00:44:22
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