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风zzz

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我没有做过,但是看过师兄做的,灭菌,然后DEPC水泡24h,再用之前灭菌121℃,20min。我师兄是做转染的!
态度决定一切!
21楼2012-11-07 21:24:56
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czcpudai

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
20楼: Originally posted by 木小默 at 2012-11-07 20:10:37
把你要用的东西全部放在depc水里过夜,12小时左右就好,然后灭菌就好了!祝你成功!

,恩确实这样做了 做了RT-PCR,目的条带都出来了,谢谢!
22楼2012-11-07 22:42:12
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czcpudai

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
21楼: Originally posted by 风zzz at 2012-11-07 21:24:56
我没有做过,但是看过师兄做的,灭菌,然后DEPC水泡24h,再用之前灭菌121℃,20min。我师兄是做转染的!

非常感谢解答!!  看样子大家交流一下可以得出更好的答案!
23楼2012-11-07 22:42:55
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sxxuan

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
用到的东西,EP管,枪头等要先用DEPC水浸泡过夜,再拿去灭菌的,121,30min。记得要烘干。
操作的时候小心点,一般都不会说降解很厉害的。
你的日子如何,你的力量也必如何!
24楼2012-11-08 11:49:52
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czcpudai

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
24楼: Originally posted by sxxuan at 2012-11-08 11:49:52
用到的东西,EP管,枪头等要先用DEPC水浸泡过夜,再拿去灭菌的,121,30min。记得要烘干。
操作的时候小心点,一般都不会说降解很厉害的。

,是的,我都是这样子做的,一般是放在饭盒中浸泡的。然后倒出DEPC水,进行高压灭菌,但是烘干的时候80烘了一天都没干! 我还想问,用DEPC水浸泡过夜,再拿去灭菌的(121,30min),烘干后,这样子的枪头或者EP管可以用多长时间或者是几次呢???
25楼2012-11-08 12:26:52
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jl860822

金虫 (正式写手)


【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
耐高温的直接放200°烘烤,不耐高温的直接用DEPC处理后灭菌,建议楼主还是直接买现成的吧
26楼2012-11-08 12:38:08
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czcpudai

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
26楼: Originally posted by jl860822 at 2012-11-08 12:38:08
耐高温的直接放200°烘烤,不耐高温的直接用DEPC处理后灭菌,建议楼主还是直接买现成的吧

是应该买那种现成的,看看往后提取的效果吧,要是不行的话就直接买现成的了~~~
27楼2012-11-08 17:51:44
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sxxuan

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-11-09 14:16:30
引用回帖:
25楼: Originally posted by czcpudai at 2012-11-08 12:26:52
,是的,我都是这样子做的,一般是放在饭盒中浸泡的。然后倒出DEPC水,进行高压灭菌,但是烘干的时候80烘了一天都没干! 我还想问,用DEPC水浸泡过夜,再拿去灭菌的(121,30min),烘干后,这样子的枪头 ...

不是都是一次性的吗?还能重复用?
我一般是提取一次就用一批,或者开封后放在超净工作台。但如果超过一周不用,我还是会重新处理的。
不过我后来懒了,不用DEPC水处理,直接灭菌30min,提取出来也没有降解,但前提是我尽快逆转录成cDNA放-80保存。用途不一样的RNA,仅供参考。
你的日子如何,你的力量也必如何!
28楼2012-11-09 09:25:17
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czcpudai

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
28楼: Originally posted by sxxuan at 2012-11-09 09:25:17
不是都是一次性的吗?还能重复用?
我一般是提取一次就用一批,或者开封后放在超净工作台。但如果超过一周不用,我还是会重新处理的。
不过我后来懒了,不用DEPC水处理,直接灭菌30min,提取出来也没有降解,但前 ...

恩  好的! 我也是提取出来后直接做RT的~~~
29楼2012-11-09 10:18:48
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