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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 提取RNA前如何除掉RNA酶~~高温灭菌121℃，2个小时是不是可以除掉RNA酶？
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czcpudai

铜虫 (正式写手)

[求助] 提取RNA前如何除掉RNA酶~~高温灭菌121℃，2个小时是不是可以除掉RNA酶？

各位提取过RNA的同学，我想问一下RNA酶除了DEPC水处理后，连续高压灭菌121℃，2小时是不是可以除掉RNA酶？？？？
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1楼 2012-11-06 14:53:34
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sxxuan

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-11-09 14:16:30
引用回帖:
25楼: Originally posted by czcpudai at 2012-11-08 12:26:52
，是的，我都是这样子做的，一般是放在饭盒中浸泡的。然后倒出DEPC水，进行高压灭菌，但是烘干的时候80烘了一天都没干！ 我还想问，用DEPC水浸泡过夜，再拿去灭菌的（121，30min），烘干后，这样子的枪头 ...

不是都是一次性的吗？还能重复用？
我一般是提取一次就用一批，或者开封后放在超净工作台。但如果超过一周不用，我还是会重新处理的。
不过我后来懒了，不用DEPC水处理，直接灭菌30min，提取出来也没有降解，但前提是我尽快逆转录成cDNA放-80保存。用途不一样的RNA，仅供参考。
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你的日子如何，你的力量也必如何！
28楼2012-11-09 09:25:17
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紫色的梦想

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
以前我提RNA的时候就是这么做的，还可以了。。不过你可以用试剂盒，买处理好的管子更方便点。
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2楼2012-11-06 14:59:53
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czcpudai

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 紫色的梦想 at 2012-11-06 14:59:53
以前我提RNA的时候就是这么做的，还可以了。。不过你可以用试剂盒，买处理好的管子更方便点。

试剂盒还是蛮贵的哈，呵呵   您这样做之后RNA的完整性和纯度都还挺好的吧？？？ 谢谢！
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3楼2012-11-06 15:10:11
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czcpudai

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by diandong at 2012-11-06 18:36:27
180度，3h.

枪头要那么高的温度吗？ 会不会直接化掉了？
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5楼2012-11-06 18:51:03
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