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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » RNA提取，关于样品研磨
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machao8405

木虫 (正式写手)

[求助] RNA提取，关于样品研磨 已有14人参与

在样品研磨中，总是一个体力活还是一个细心的活，特别是样品量比较大的时候。之前都是在液氮中研钵里研磨的，一天最多抽提48个样品，还要及时做RT-PCR，感觉很累。大家有没有用过像个小电钻一样的研磨器（一次一个）？或者是放进去一个钢珠的震荡式的那种研磨器（一次大量）？或者有更好的研磨方法?
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1楼 2014-12-01 19:59:35
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

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还是液氮研磨的靠谱

[ 发自小木虫客户端 ]
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2楼2014-12-01 21:57:46
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宋伟同学

铜虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
听没听说过磁珠法或磁棒法核酸提取仪。我问过好几家，都是大概60万左右一台。你看自己条件吧，我硕导曾经很感兴趣，一听60万，说，把咱仨卖了吧。呵呵。
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7楼2014-12-02 17:29:06
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普通回帖

稻稻

铜虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
那个很粗放，我们提大批量DNA时才会用。建议别那么做。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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做一个不动声色的人，不准情绪化，不准回头看。
3楼2014-12-01 23:00:13
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biotech_zhou

木虫 (著名写手)

待人以诚：专业/专注/专心

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
实验有时候就是个体力活，还是老实用液氮研磨吧。
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4楼2014-12-02 10:46:22
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lilei2008syc

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
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machao8405(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-12-02 18:39:21
那个研磨的不够充分，效果不如手动研磨，之前有师兄用过，只是很碎，却不是粉末
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5楼2014-12-02 11:31:23
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jiebingzh

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
machao8405(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-12-02 18:39:31
高通量组织研磨仪，我用过新芝的192，在液氮中冻得足够久的话，研磨效果挺好的。
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6楼2014-12-02 16:34:20
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意萧02

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
machao8405(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-12-02 18:39:51
RNA还是一个一个手动磨比较靠谱，大批量降解的可能性超大，不信你试试。我用过电钻，还有钢珠的震荡器，一次96个样的那种，效果很差，还急得半死！

[ 发自小木虫客户端 ]
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8楼2014-12-02 17:49:49
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lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
machao8405(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-12-02 18:40:01
我实验室有用过震荡式的研磨器研磨过样不要太多效果还可以。如果样品多再一个建议你分几天提，每次提取的RNA保存到异丙醇或70%酒精里，统一反转。
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hehe
9楼2014-12-02 17:50:14
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毅坚

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
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machao8405(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-12-02 20:41:45
您好，液氮研磨要比组织破碎仪的条件更加温和，一般效果会更好的。液氮研磨咋一看像个粗活，但真正要又快又好地把样品研成均匀粉末状还是要些技巧的，需要你自己拿捏一些节奏并不断通过实际操作练习。对于大批量的样品，液氮研磨可能会显得效率不高，个人建议可以做个预实验：研磨VS破碎。通过后期效果对比决定用那种方法，我之前150多个苹果叶片就是用破碎仪处理的，效果跟研磨不相上下，省了不少事，不过也是要看具体样品的情况而定的。可以自己总结一些适合破碎的样品类型，对于后续工作很有帮助，会让你觉得得心应手的。
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10楼2014-12-02 19:01:13
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