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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白/酶 » SDS-PAGE电泳图为什么会跑成这样呢？
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加冕之王

新虫 (初入文坛)

[求助] SDS-PAGE电泳图为什么会跑成这样呢？ 已有2人参与

我第一次做SDS-PAGE电泳，一开始用的是80V的电压，然后在分离胶是用的是120V的电压，跑出来发现条带歪了，而且下面有一条空白区域，为什么我的蛋白条带这么不清晰呢？恳请各位师兄师姐赐教！

SDS-PAGE电泳图为什么会跑成这样呢？
复件 IMG_3159_副本.jpg
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1楼 2014-11-30 20:47:13
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邓思静

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
蛋白在胶上是看不见的，只能通过maker来确定分子量

[ 发自小木虫客户端 ]
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2楼2014-11-30 23:23:04
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弑者星魂

金虫 (正式写手)
你是用考马斯染的色吗

[ 发自小木虫客户端 ]
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3楼2014-12-01 23:23:10
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老liao

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你的蛋白浓度过低或者上样量太少，可以多上三四倍；
溴酚蓝指示剂前沿会因为导电离子堆积等原因，会出现一条透明的带不奇怪；
跑出来条带有点歪是因为聚合得仍然不够充分，下次可以稍微多加点催化剂，或者放在温度高一点的地方聚合。

祝你成功。
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4楼2014-12-02 09:23:28
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加冕之王

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 弑者星魂 at 2014-12-01 23:23:10
你是用考马斯染的色吗

嗯，是的
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5楼2014-12-03 09:37:18
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加冕之王

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 老liao at 2014-12-02 09:23:28
你的蛋白浓度过低或者上样量太少，可以多上三四倍；
溴酚蓝指示剂前沿会因为导电离子堆积等原因，会出现一条透明的带不奇怪；
跑出来条带有点歪是因为聚合得仍然不够充分，下次可以稍微多加点催化剂，或者放在温度 ...

嗯，谢谢，我的AP和TEMED都多加了点然后放在37度的地方凝固，样品可能是浓度太低了，不过也加了40ul了
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6楼2014-12-03 09:38:49
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加冕之王

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 邓思静 at 2014-11-30 23:23:04
蛋白在胶上是看不见的，只能通过maker来确定分子量

嗯
7楼2014-12-03 09:39:08
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