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加冕之王

新虫 (初入文坛)

[求助] SDS-PAGE电泳图为什么会跑成这样呢? 已有2人参与

我第一次做SDS-PAGE电泳,一开始用的是80V的电压,然后在分离胶是用的是120V的电压,跑出来发现条带歪了,而且下面有一条空白区域,为什么我的蛋白条带这么不清晰呢?恳请各位师兄师姐赐教!

SDS-PAGE电泳图为什么会跑成这样呢?
复件 IMG_3159_副本.jpg
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邓思静

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
蛋白在胶上是看不见的,只能通过maker来确定分子量

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2014-11-30 23:23:04
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弑者星魂

金虫 (正式写手)

你是用考马斯染的色吗

[ 发自小木虫客户端 ]
3楼2014-12-01 23:23:10
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老liao

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你的蛋白浓度过低或者上样量太少,可以多上三四倍;
溴酚蓝指示剂前沿会因为导电离子堆积等原因,会出现一条透明的带不奇怪;
跑出来条带有点歪是因为聚合得仍然不够充分,下次可以稍微多加点催化剂,或者放在温度高一点的地方聚合。

祝你成功。
4楼2014-12-02 09:23:28
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加冕之王

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 弑者星魂 at 2014-12-01 23:23:10
你是用考马斯染的色吗

嗯,是的
5楼2014-12-03 09:37:18
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加冕之王

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 老liao at 2014-12-02 09:23:28
你的蛋白浓度过低或者上样量太少,可以多上三四倍;
溴酚蓝指示剂前沿会因为导电离子堆积等原因,会出现一条透明的带不奇怪;
跑出来条带有点歪是因为聚合得仍然不够充分,下次可以稍微多加点催化剂,或者放在温度 ...

嗯,谢谢,我的AP和TEMED都多加了点然后放在37度的地方凝固,样品可能是浓度太低了,不过也加了40ul了
6楼2014-12-03 09:38:49
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加冕之王

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 邓思静 at 2014-11-30 23:23:04
蛋白在胶上是看不见的,只能通过maker来确定分子量

7楼2014-12-03 09:39:08
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